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S-アリル-Lシステインは成長ホルモン受容体を刺激して肝実質細胞の増殖を促進する
茂木 肇、荻原 政彦、木村 光利
日本薬学会第145年会(福岡) 2025.03 日本薬学会
Event date: 2025.03
Language:Japanese Presentation type:Poster presentation
Venue:福岡国際会議場 Country:Japan
【目的・方法】S-アリル-L-システイン(SAC)は、熟成ニンニクに含まれる含硫アミノ酸の一種であり、抗酸化作用や抗炎症作用といった薬理作用が報告されている。近年、SACは細胞増殖促進作用も有していることが報告されており、我々は以前、初代培養肝実質細胞においてSACがヤーヌスキナーゼ(JAK)2/ホスホリパーゼC(PLC)経路を介してインスリン様増殖因子1型(IGF-I)を分泌することにより細胞増殖促進作用を示したことを明らかとした。このJAK2/PLC/IGF-I分泌機構は、成長ホルモン(GH)でも確認されていることから、我々は、SACがGH受容体に結合すると仮説を立てた。そこで本研究では、GH受容体に対する免疫蛍光法(GH受容体イメージング)を用いて、SACまたはGH存在下において抗GH受容体モノクローナル抗体(抗GHR mAb)とGH受容体との親和性に関する検討を行った。
【結果・考察】肝実質細胞のGH受容体は、蛍光色素で標識された抗GHR mAbにより蛍光シグナルを発した。一方、SAC存在下における蛍光シグナルはSAC不在下と比較して減少する傾向が認められ、その効果はSACの用量に依存した。GHにおいても同様の傾向が認められた。これに対し、S-メチル-L-システインでは、蛍光シグナルの減少は認められなかった。これらの結果から、SACは肝実質細胞膜に発現しているGH受容体と結合することにより、肝実質細胞増殖促進作用を発揮することが明らかとなった。 -
Triiodothyronine promotes hepatocyte proliferation through EGF/TGF-α RTK/PI3K/ERK pathway in primary cultured rat hepatocytes.
Hajime Moteki, Masahiko Ogihara and Mitsutoshi Kimura
2025.03
Event date: 2025.03
Language:Japanese Presentation type:Poster presentation
Country:Japan
We have previously investigated the intracellular mechanisms of growth factors, cytokines, and hormones secreted during liver regeneration using primary cultured hepatocytes. In the course of this study, we discovered that triiodothyronine (T3) promotes hepatocyte proliferation. T3, a thyroid hormone (along with thyroxine: T4, and reverse T3: rT3), is an amino acid-derived hormone that enhances the metabolic efficiency of various cells. Its secretion has been observed to increase during liver regeneration. However, the exact mechanisms of the T3 promotes hepatocyte proliferation remain unclear. The aim of this study was to examine the detailed signal transduction pathways involved in T3-induced cell proliferation in primary cultures of adult rat hepatocytes. Hepatocyte proliferation was assessed by counting the number of nuclei and measuring the incorporation of [3H]-thymidine incorporation into DNA synthesis. T3-stimulated hepatocytes exhibited a proliferative effect that was both culture time- and dose-dependent, with effective concentrations ranging from 10⁻¹⁰ to 10⁻⁵ M. In contrast, neither T4 nor rT3 elicited any proliferative response in hepatocytes. Furthermore, the proliferative effect induced by T3 was significantly suppressed by the specific EGF/TGF-α receptor tyrosine kinase inhibitor AG1478, the PI3K inhibitor LY294002, and the MEK inhibitor PD98059. While T3 is known to cross the cell membrane and bind to thyroid hormone receptors in the nucleus, these results suggest that the hepatocyte proliferative effect induced by T3 may involve not only nuclear receptors but also the EGF/TGF-α RTK/PI3K/ERK pathway.
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Proliferative effects of erythropoietin in primary cultures of adult rat hepatocytes.
Yuka Kano, Rina Ueki, Harua Nonaka, Hajime Moteki, Masahiko Ogihara, Mitsutoshi Kimura
2024.03
Event date: 2024.03
Language:Japanese Presentation type:Poster presentation
Country:Japan
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Proliferative effects of thyroid hormones on primary cultured of adult rat hepatic parenchymal cells
Hajime Moteki, Miho Akimoto, Masahiko Ogihara, Mitsutoshi Kimura
2024.03
Event date: 2024.03
Language:Japanese Presentation type:Poster presentation
Country:Japan
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Effects of S-allyl-L-cysteine on binding to growth hormone receptors in primary cultures of adult rat hepatocytes.
Hajime Moteki, Masahiko Ogihara and Mitsutoshi Kimura
2023.12
Event date: 2023.12
Language:Japanese Presentation type:Poster presentation
Country:Japan
We previously reported that S-allyl-L-cysteine (SAC)-induced cell proliferation was involved in intracellular insulin-like growth factor (IGF)-I secretion via the Janus kinase 2 (JAK2) / phospholipase C (PLC) pathway in primary cultures of adult rat hepatocytes. Furthermore, we demonstrated that growth hormone (GH) stimulates the GH receptors in cultured hepatocytes to promote IGF-I secretion through the JAK2/PLC pathway. In this study, we investigated whether SAC binds to GH receptors by examining the affinity between the anti-GH receptor monoclonal antibody (anti-GHR mAb) and GH receptors in the presence of SAC or GH using a GH receptor immunofluorescence technique (GH receptor imaging). The GHR in hepatocytes emitted a fluorescent signal when labeled with a fluorescent dye-coupled anti-GHR mAb. Interestingly, SAC-treated fluorescent signals tended to decrease compared to the absence of SAC, and this effect was dependent on SAC doses. A similar trend was observed in GH treatment. In contrast, S-methyl-L-cysteine, which is a structural analog of SAC and has no hepatocyte proliferation capacity, did not show any decrease in fluorescence intensity. These results indicate that SAC shares the same binding site as GH for the GH receptor. In other words, SAC induces JAK2 phosphorylation by binding to GH receptors expressed on the hepatocyte membrane.
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Potentiating effects of α1-adrenoceptor agonists on S-allyl-L-cysteine-included ERK2 phosphorylation in primary cultures of adult rat hepatocytes.
Hajime Moteki, Masahiko Ogihara, Mitsutoshi Kimura
2023.03
Event date: 2023.03
Language:Japanese Presentation type:Poster presentation
Country:Japan
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Effects of S-allyl-L-cysteine on phosphorylation of insulin-like growth factor type-I receptor tyrosine kinase in primary cultures of adult rat hepatocytes.
Hajime Moteki, Masahiko Ogihara, Mitsutoshi Kimura
2022.12
Event date: 2022.11 - 2022.12
Language:Japanese Presentation type:Poster presentation
Country:Japan
We previously reported that S-allyl-L-cysteine (SAC)-induced cell proliferation was involved in intracellular IGF-I secretion via Janus kinase 2 (JAK2) / phospholipase C (PLC) pathway in primary cultures of adult rat hepatocytes. In this study, we investigated the involvement of IGF-I receptor tyrosine kinase (RTK) in the SAC-induced hepatocyte proliferation by using Western blot analysis. IGF-I RTK (p95 kDa) phosphorylation in cultured hepatocytes peaked 20 min after SAC stimulation. SAC-induced IGF-I RTK phosphorylation was suppressed not only by the IGF-I RTK inhibitor AG538 but also by the JAK2 inhibitor TG101209 and the PLC inhibitor U-73122. Furthermore, the SAC-induced cell proliferation was significantly suppressed by PI3 kinase inhibitor LY294002, MEK inhibitor PD98059, and mTOR inhibitor rapamycin. These results suggested that the SAC-induced IGF-I RTK phosphorylation is mediated by JAK2/PLC phosphorylation and subsequently released IGF-I phosphorylates IGF-I RTK. Then hepatocyte proliferation may be induced via IGF-I RTK / PI3 kinase / MEK / mTOR pathway.
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HepG2細胞の増殖能に対するS-allyl-L-cysteineおよびそのシクロデキストリン包接化合物の影響に関する研究
斎藤 紘生、立川 吏乃、茂木 肇、谷川 尚、井上 裕、木村 光利
第66回日本薬学会関東支部大会 2022.09 日本薬学会関東支部
Event date: 2022.09
Language:Japanese Presentation type:Poster presentation
Venue:横浜薬科大学 Country:Japan
【目的】S-Allyl-L-cysteine (SAC) は、ニンニクに多く含まれる含硫アミノ酸であり、種々のがん細胞に対して、細胞増殖抑制作用を示すことが報告されている。Cyclodextrin (CD) は、D-グルコース同士がα-1,4結合した環状オリゴ糖であり、それぞれグルコース数に応じてα型、β型およびγ型に分類される。そこでCDsを用いてSACとの包接複合体を調製により、CDの違いにより包接挙動に違いが考えられる。そこで本研究は、SACおよびそのSAC/CDs包接化合物がHepG2細胞増殖抑制作用にどのような影響があるか比較することによりSACの効果の違いについて考察した。
【方法】35φdishに播種し接着したHepG2細胞(1.0×10⁴ cells/cm²)に、SACおよびSAC/CDs包接化合物を添加し、一定期間培養した。培養後、Triton-X100でHepG2細胞から裸核を得て、その核数を血球計算盤により計測した。
【結果および考察】培養3日目におけるHepG2細胞の増殖に対して、SAC(10-6M)単独添加群は、コントロール群と比較して約14%の減少が認められた。これに対し、β-CD/ SAC群は、約30%の核数の減少が認められた。一方、α-およびγ-CD/SAC群は、更なる核数の減少効果は認められなかった。β-CD/ SACは、S-allyl基が露出しているため、SACのHepG2細胞増殖抑制作用には、S-allyl基が重要であると考えられる。 -
初代培養肝実質細胞における成長ホルモンのJAK2/ PLC/ IGF-I受容体チロシンキナーゼ経路を介した細胞増殖促進作用に関する研究 International conference
茂木 肇、荻原 政彦、木村 光利
日本薬学会第142年会(名古屋) 日本薬学会
Event date: 2022.03
Language:Japanese Presentation type:Poster presentation
Venue:名古屋(オンライン)
【目的】当研究室では、これまで肝再生の分子機構の解明の一端として、肝再生中に分泌される増殖因子やサイトカインの細胞増殖メカニズムを検討してきた。脳下垂体前葉ホルモンである成長ホルモン(GH)は、細胞の増殖を促進させるホルモンであり、肝再生にも大きく影響を及ぼす。GHの細胞増殖促進作用は、JAK/STAT/IGF-I経路を介することが知られているが、近年、その他にも様々な経路により標的器官の細胞分裂を起こしていることが明らかとなってきている。本研究では初代培養肝実質細胞を用いて、GHの細胞増殖メカニズムの新たな見解を検討したので報告する。
【方法】In situコラゲナーゼ還流法により、成熟ラットから肝実質細胞を単離し、初代培養を行った。細胞接着後、無血清培地に交換し、種々の濃度のGHまたは特異的シグナル伝達因子阻害薬を添加した。一定時間培養後、肝実質細胞のDNA合成能及び核数を計測した。また、JAK2およびIGF-I受容体チロシンキナーゼ(RTK)のリン酸化活性はWestern blot法を用いて測定した。
【結果及び考察】GHは、初代培養肝実質細胞に対して、用量および培養時間に依存して有意なDNA合成および細胞増殖促進作用を示した。GH誘発肝細胞増殖促進作用は、特異的JAK2阻害薬(TG101209)、特異的PLC阻害薬(U-73122)、特異的IGF-I受容体チロシンキナーゼ阻害薬(AG538)によって有意に抑制された。しかし、特異的STAT3/5阻害薬(SH-4-54)ではGHの肝細胞増殖促進作用を抑制しなかった。また、GHは肝実質細胞のJAK2およびIGF-IRTKのリン酸化活性を有意に促進させ、その上昇ピークはJAK2の方が早かった。これらの結果から、初代培養肝実質細胞におけるGH増殖促進作用はJAK2/PLC/IGF-I RTKを介することが明らかとなった。 -
Signal transduction mechanism for autocrine secretion of insulin-growth factor type 1 by S-allyl-L-cysteine in primary cultures of adult rat hepatocytes
Event date: 2022.03 - 2203.03
Language:Japanese Presentation type:Poster presentation
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部分肝切除ラットにおけるERKおよびAktリン酸化活性に対するS-allyl-L-cysteineの促進効果の検討
石井 貴久、赤木 友香、栗原 一樹、茂木 肇、荻原 政彦、木村 光利
第65回日本薬学会関東支部大会(千葉) 日本薬学会関東支部
Event date: 2021.09
Language:Japanese Presentation type:Poster presentation
Venue:千葉(オンライン)
【目的】S-Allyl-L-cysteine (SAC) は、熟成ニンニクに含まれる含硫アミノ酸の一種であり、抗酸化作用や抗炎症作用などがあることから、健康補助食品に利用されている。さらに過去の我々の研究で、部分肝切除ラットにおいてSACが肝再生を促進させることが明らかとなった。しかし、SACの肝再生促進作用のメカニズムは未だ不明な部分が多い。本研究では、細胞増殖に関わりの深いタンパク質であるERK1/2とAktに焦点を当て、Western blot解析法を用いて、部分肝切除ラットにおけるERK1/2およびAktリン酸化活性に対するSACの効果について検討した。
【方法】Wistar系雄性ラットにHigginsらによる70%部分肝切除術を施行し、肝再生モデル動物を作成した。モデル動物にSAC (300 mg/kg, p.o.) を投与し、一定期間飼育した後、残余肝を摘出した。残余肝からトライゾール試薬により抽出したタンパク質を基にWestern blot解析法を用いてERK1/2およびAktのリン酸化活性を測定した。
【結果および考察】部分肝切除後のSAC投与群において、ERK2およびAktリン酸化活性は、切除後3時間と6時間で有意差に増加した。一方、ERK1リン酸化活性は部分肝切除24時間まで有意差が認められなかった。これにより、SACは、ERK2およびAktのリン酸化を促進させることにより肝再生を促進させると考えられる。 -
成熟ラット初代培養肝実質細胞に対するN-acetyl-S-phenyl-L-cysteineの細胞増殖促進作用機構の検討
浅田 健一、石垣 太基、栗原 一樹、茂木 肇、荻原 政彦、 木村 光利
第65回日本薬学会関東支部大会(千葉) 日本薬学会関東支部
Event date: 2021.09
Language:Japanese Presentation type:Poster presentation
Venue:千葉(オンライン)
【目的】N-Acetyl-S-phenyl-L-cysteine (Nac-SPC) は、L-cysteineの誘導体であるS-allyl-L- cysteine (SAC)のallyl基がphenyl基に置換し、さらにN-acetyl化された水溶性化合物である。SACは過去の我々の研究において、初代培養肝実質細胞増殖促進作用が認められているが、Nac-SPCは、SACのような細胞増殖促進作用は報告されていない。そこで、本研究では、初代培養肝実質細胞を用いてNac-SPCの細胞増殖促進作用とその作用メカニズムについて薬理学的な検討を行った。
【方法】In situコラゲナーゼ還流法により、成熟ラットから肝実質細胞を単離し、初代培養を行った。細胞接着後、無血清培地に培地交換し、Nac-SPCおよび特異的シグナル伝達因子阻害薬を添加し一定時間培養した。培養後、Triton-X100で肝実質細胞の細胞膜を溶かし、裸核を得て、その核数を血球計算盤により計測した。
【結果および考察】Nac-SPCは初代培養肝実質細胞に対して用量および培養時間に依存して細胞増殖促進作用を示した。さらにNac-SPCにより誘発された肝実質細胞増殖促進作用は、PD98059、LY294002およびrapamycinにより抑制された。これによりNac-SPCによる肝実質細胞増殖促進作用は、少なくともMEK、PI3KおよびmTORが関与していると考えられる。 -
成熟ラット初代培養肝実質細胞に対するS-phenyl-L-cysteineの細胞増殖促進作用機構の検討
伊藤 元気、江口 佑太、栗原 一樹、茂木 肇、荻原 政彦、 木村 光利
第65回日本薬学会関東支部大会(千葉) 日本薬学会関東支部
Event date: 2021.09
Language:Japanese Presentation type:Poster presentation
Venue:千葉(オンライン)
【目的】S-Allyl-L-cysteine (SAC) は、熟成ニンニクに含まれる含硫アミノ酸の一種であり、抗酸化作用や抗炎症作用を示す他、細胞増殖促進作用も示すことが、過去の我々の研究において明らかとなっている。一方、SACのallyl基がphenyl基に置換されたS-phenyl-L-cysteine (SPC) は、ベンゼンによる暴露の潜在的なバイオマーカーとして利用されているが、SACのような細胞増殖促進作用は報告されていない。そこで、本研究では、初代培養肝実質細胞を用いてSPCの細胞増殖促進作用とその作用メカニズムについて薬理学的な検討を行った。
【方法】In situコラゲナーゼ還流法により、成熟ラットから肝実質細胞を単離し、初代培養を行った。細胞接着後、無血清培地に培地交換し、SPCおよび特異的シグナル伝達因子阻害薬を添加し一定時間培養した。培養後、Triton-X100で肝実質細胞の細胞膜を溶かし、裸核を得て、その核数を血球計算盤により計測した。
【結果および考察】SPCは肝実質細胞に対して、用量および培養時間に依存して細胞増殖促進作用を示した。さらにSPCによって誘発された肝実質細胞増殖促進作用は、PD98059、LY294002およびrapamycinにより抑制された。これによりSPCによる肝実質細胞増殖促進作用は、少なくともMEK、PI3K、mTORが関与していると考えられる。 -
70%部分肝切除ラットにおけるS-allyl-L-cysteineの肝再生促進作用はIGF-1とその受容体のmRNAの発現量増加を介する
栗原 一樹、茂木 肇、夏目 秀視、荻原 政彦、木村 光利
日本薬学会第141年会(広島) 日本薬学会
Event date: 2021.03
Language:Japanese Presentation type:Poster presentation
Venue:広島(オンライン)
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In vivo S-allyl-L-cysteine and some analogues accelerate liver regeneration in 70% partially hepatectomized rats.
Event date: 2021.03
Language:Japanese Presentation type:Poster presentation
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Signal transduction mechanism for S-allyl-L-cysteine-induced cell proliferation in primary cultures of adult rat hepatocytes
Event date: 2021.03
Language:Japanese Presentation type:Poster presentation
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ラット初代培養肝実質細胞におけるEGF誘発細胞増殖促進作用に対する葉酸およびテトラヒドロ葉酸の抑制効果に関する研究
高橋 智也、栗原 一樹、茂木 肇、荻原 政彦、木村 光利
第64回日本薬学会関東支部大会 日本薬学会関東支部
Event date: 2020.09
Language:Japanese Presentation type:Poster presentation
Venue:オンライン
【目的】葉酸(FA)はビタミンB群の一種であり、核酸塩基の生合成等に関わることから、細胞の増殖に重要な役割を果たしている。一方、いくつかの報告においてFAは細胞増殖抑制作用も有することが明らかになってきており、我々の過去の研究においても、FAがEGF誘発肝実質細胞増殖促進作用を抑制することが明らかとなっている。本研究ではFAの細胞増殖抑制作用の詳細を検討するため、ラット初代培養肝実質細胞におけるEGF誘発細胞増殖促進作用に対するFAとその代謝産物であるテトラヒドロ葉酸(THF)の増殖抑制効果の比較検討を行った。
【方法】In situコラゲナーゼ還流法により、成熟ラットから肝実質細胞を単離し、初代培養を行った。細胞接着後、無血清培地に交換し、EGF(20 ng/ml)および種々の濃度のFAやTHFまたはメトトレキサート(MTX)を添加し一定時間培養した。培養後、Triton-X100で肝実質細胞を裸核し、その核数を血球計算盤により計測した。
【結果および考察】FAおよびTHFは、EGF誘発肝実質細胞増殖促進作用に対し用量依存的に抑制効果を示した。一方、MTX共存下ではFAの増殖抑制効果のキャンセルが認められ、その核数はEGF単独と同等の値を示した。これに対し、THFの増殖抑制効果はMTX共存下においても影響を及ぼさなかった。これらにより、FAは細胞内でTHFに代謝されたのちEGF誘発肝実質細胞増殖促進作用を抑制したと考えられる。 -
HepG2細胞に対するTG101209の細胞増殖抑制作用に関する研究
和田 一美、持田 真生、糸永 直人、栗原 一樹、茂木 肇荻原 政彦、木村 光利
第64回日本薬学会関東支部大会 日本薬学会関東支部
Event date: 2020.09
Language:Japanese Presentation type:Poster presentation
Venue:オンライン
【目的】ヒト肝癌細胞HepG2の増殖には、インターロイキン6(IL-6)のような炎症性サイトカインの過剰発現が関与しているといわれている。IL-6は、JAK/STAT経路を活性化させることが知られているが、HepG2細胞の増殖において、JAK/STAT経路を介した詳細なメカニズムについては不明な部分が多い。本研究では、特異的JAK2阻害薬であるTG101209を用いて、HepG2細胞の増殖能、タンパク質リン酸化活性(JAK2、MAPK)を測定し、JAK/STAT経路の関与について検討した。
【方法】HepG2細胞を1.0×104 cells/cm2になるよう播種し、5%FBS含有DMEMにより一晩接着培養させた。培養後、Triton-X100で肝実質細胞を裸核とし、その核数を血球計算盤により計測した。また、JAK2やMAPKのリン酸化活性はWestern blot解析法を用いて測定した。
【結果および考察】HepG2細胞の増殖に関し、培養5日目においてTG101209の用量に依存して有意な核数の減少が認められた。また、HepG2細胞のJAK2リン酸化活性は、TG101209(3.0×10-7M)の添加により有意な抑制が認められた。一方、TG101209はMAPKリン酸化活性に影響を及ぼさなかった。これにより、HepG2細胞は、JAK2を介してその増殖を促進していると考えられる。 -
70%部分肝切除ラットにおける含硫アミノ酸誘導体S-ally-L-cysteineの肝再生促進作用の検討
栗原 一樹、茂木 肇、荻原 政彦、木村 光利
日本薬学会第140年会(京都) 日本薬学会
Event date: 2020.03
Language:Japanese Presentation type:Poster presentation
Venue:国立京都国際会議場
【目的】当研究室では、肝再生現象の in vivo モデル実験系として、70 %部分肝切除(70% PH)を施した ラットを用いて、肝再生を促進する薬物の探索を検討してきた。その一連の研究の中で、含硫アミノ酸 L-cysteine (Cys)の誘導体の一種であるS-allyl-L-cysteine (SAC)が肝再生促進作用を有することを見出した。そ れまでSACは、構造中の硫黄(S)原子による抗炎症作用により組織修復を促進すると考えられていた。一 方、L-CysのS原子にメチル基が結合したS-methyl-L-cysteine(SMC)では 、エタノール誘発急性肝障害に対し て、抗炎症作用が認められているが、肝再生に対する効果は不明である。そこで本研究は、SACとSMCの肝再 生促進作用を肝重量やDNA合成能を測定することで評価した。
【方法】Wistar系雄性ラットにイソフルラン麻酔下で70% PHを施行し、肝再生モデル動物を作製し た。種々の用量のSACあるいはSMCを、術直後より1日1回腹腔内投与し、一定期間飼育した。その 後、BrdU(50 mg/kg, i.p.)を前投与し、採血した後、残余肝を摘出し、その肝重量を測定した。さらにその残余 肝をホルマリン固定・パラフィン包埋・薄切し、組織切片を作製した。肝組織切片はBrdU Immunohistochemistry Kitにて、肝細胞の核に取り込まれたBrdUを染色し、染色された細胞割合(labeling index;LI)を計測し、DNA合成能を評価した。
【結果及び考察】70% PHしたcontrol群では、術後5日目まで穏やかな肝重量の増加を示した。これに対 し、SAC投与群では、術後2日目においてcontrol群と比較し、急激な肝重量の増加が認められた。一 方、SMC投与群ではcontrol群と比較して有意な増加はみられなかった。DNA合成能においても、術後1日目に おいてSAC投与群でcontrol群と比較し、有意な上昇が認められた。一方、SMC投与群ではcontrol群と比較 し、有意な上昇はみられなかった。これらの結果から、70 % PHラットに対する含硫アミノ酸の肝再生促進作 用はL-Cys の S原子に結合したアリル基が寄与することが示唆された。 -
Activation of ribosomal p70 S6 kinase by selective serotonin (5-HT)2B receptor agonist BW723C86 is mediated by epidermal growth factor/transforming growth factor-α receptor tyrosine kinase in primary cultures of adult rat hepatocytes.
Event date: 2020.03
Language:Japanese Presentation type:Poster presentation
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ICR マウスにおけるアセトアミノフェン誘発肝障害に及ぼす投与時期の影響に関する検討
宮垣愛、五十嵐力也、栗原一樹、茂木肇、木村光利、荻原政彦
第63回日本薬学会関東支部大会 日本薬学会関東支部
Event date: 2019.09
Language:Japanese Presentation type:Poster presentation
Venue:北里大学薬学部(白金キャンパス)
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初代培養肝実質細胞における四塩化炭素誘発障害に対するアミノ酸の抗炎症作用の検討
中野雄也、栗田恭輔、栗原一樹、茂木肇、木村光利、荻原政彦
第63回日本薬学会関東支部大会 日本薬学会関東支部
Event date: 2019.09
Language:Japanese Presentation type:Poster presentation
Venue:北里大学薬学部(白金キャンパス)
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ラット初代培養肝実質細胞における葉酸の細胞増殖抑制作用に関する検討
中西航汰、田中彰太、関口祐、栗原一樹、内藤浩太、茂木肇、荻原政彦、木村光利
第62回日本薬学会関東支部大会 日本薬学会関東支部
Event date: 2018.09
Language:Japanese Presentation type:Poster presentation
Venue:帝京平成大学
【目的】当研究室では、肝再生現象のin vitroモデルとして、初代培養肝実質細胞実験系を独自に開発し、いくつかの増殖因子やサイトカインなどの肝実質細胞増殖促進作用や抑制作用について、その詳細なメカニズムを研究してきた。一連の研究の中で、我々は、水溶性ビタミンの一種である葉酸(以下、FAと略す)に着目した。FAは、DNAの生合成や細胞増殖に必須なビタミンであるが、一方で、結腸がん細胞の増殖抑制や肝再生抑制作用などの細胞増殖抑制作用も報告もされている。そこで、本研究では、上皮増殖因子(以下、EGFと略す)により誘発したラット初代培養肝実質細胞の増殖促進作用に対して、FAがどのような影響を及ぼすのかを検討した。
【方法】In situコラゲナーゼ還流法により、成熟ラットから肝実質細胞を単離・精製し、初代培養を行った。細胞接着後、無血清培地に交換し、種々の濃度のEGFまたはFAを添加した。一定時間培養後、肝実質細胞の核数を計測した。また、western bolt解析法用いて、MAPキナーゼリン酸化活性も測定した。
【結果および考察】FAは、単独では、肝実質細胞の増殖促進作用および抑制作用を示さなかったが、EGF誘発肝実質細胞増殖促進作用に対しては、その用量に依存して細胞増殖抑作用が認められた。一方、EGFによるMAPキナーゼリン酸化活性は影響を及ぼさなかった。上記の結果から、FAは、MAPキナーゼよりも下流の増殖シグナルを抑制することにより、EGF誘発肝実質細胞増殖促進作用を抑制したと考えられる。 -
Serotonin-induced DNA synthesis and proliferation are mediated by autocrine secretion of transforming growth factor-α in primary cultures of adult rat hepatocytes International conference
Kota Naito, Hajime Moteki, Mitsutoshi Kimura and Masahiko Ogihara
18th World Congress of Basic and Clinical Pharmacology Japanese Pharmacological Society / Japanese Society of Clinical Pharmacology and Therapeutics
Event date: 2018.07
Language:English Presentation type:Poster presentation
Venue:Kyoto International Conference Center
Previously, we demonstrated that serotonin (5-hydroxytryotamine; 5-HT)-induced hepatocyte DNA synthesis and proliferation are mediated through 5-HT2B receptor. Moreover, 5-HT2B receptor-mediated hepatocyte mitogenesis involves activation of the Gq/phospholipase C (PLC) pathway and the epidermal growth factor (EGF)/transforming growth factor (TGF)-α receptor tyrosine kinase (RTK)/phosphatidylinositol 3-kinase (PI3K)/extracellular signal-regulated kinase (ERK) 2/mammalian target of rapamycin (mTOR) pathway. However, how these two signaling pathways are associated with each other remains unknown. Thus we hypothesized that 5-HT2B receptor stimulated by 5-HT induces secretion of a putative primary mitogen (e.g., TGF-α, insulin-like growth factor (IGF)-I) via the Gq/PLC pathway in primary cultured hepatocytes, followed by induction of DNA synthesis and proliferation that is mediated by the EGF/TGF-α RTK/PI3K/ERK2/mTOR pathway.
Hepatocytes were isolated from normal livers by the two-step in situ collagenase perfusion to facilitate disaggregation of the adult rat liver. Isolated hepatocytes were plated onto collagen-coated plastic culture dishes and incubated for 3-h in Williams’ medium E supplemented with 5% newborn calf serum, 0.1 nM dexamethasone in 5% CO2 in air at 37℃ to allow attachment. The medium was changed to Williams’ medium E without serum and dexamethasone, and 5-HT with or without test substances was added.
We investigated effects of monoclonal antibody against TGF-α (1-100 ng/ml) or IGF-I (1-100 ng/ml) on 5-HT-induced hepatocytes DNA synthesis and proliferation. The TGF-α monoclonal antibody, but not IGF-I monoclonal antibody inhibited hepatocytes DNA synthesis and proliferation induced by 5-HT in a dose-dependent manner. Next, we tested to determine autocrine secretion of TGF-α from cultured hepatocytes. 5-HT (10-6 M) significantly increased TGF-α levels in the culture medium. The maximum TGF-α concentration (30 pg/ml) peaked 10 min after addition of 5-HT. The TGF-α secretion induced by 5-HT was completely blocked by a 5-HT2B receptor antagonist (LY272015). These results suggest that the proliferative mechanism of action of 5-HT is mediated by 5-HT2B receptor, and stimulation of 5-HT2B receptor increases autocrine TGF-α secretion from primary cultured hepatocytes.
In conclusion, our data indicate that 5-HT stimulates DNA synthesis and proliferation in primary cultures of adult rat hepatocytes by acting via autocrine secretion of TGF-α induced by the serotonin 5-HT2B receptor/Gq/PLC pathway. -
Signal Transduction Mechanism for 5-HT2B Receptor-Stimulated Autocrine Secretion of Transforming Growth Factor-α in Primary Cultures of Adult Rat Hepatocytes. International conference
Hajime Moteki, Kota Naito, Mitsutoshi Kimura and Masahiko Ogihara.
18th World Congress of Basic and Clinical Pharmacology Japanese Pharmacological Society / Japanese Society of Clinical Pharmacology and Therapeutics
Event date: 2018.07
Language:English Presentation type:Poster presentation
Venue:Kyoto International Conference Center
In the past decade, we have been investigated the cellular and molecular mechanisms of action of various growth factors, cytokines and autacoids using primary culture of adult rat hepatocytes in vitro. We focused on serotonin (5-HT) in a previous study. 5-HT mediates many types of biological responses such as platelet aggregation, vascular constriction, and cell proliferation and mediates a diverse array of responses by interacting with 5-HT receptor subtype in mammals. In the previous report, we demonstrated that 5-HT-induced hepatocyte DNA synthesis and proliferation are mediated through 5-HT2B receptors. Moreover, their proliferative effects were brought about by autocrine secretion of transforming growth factor-α (TGF-α). In this study, we examined the mechanisms responsible for regulating the rapid increase in TGF-α concentrations after stimulation of 5-HT2B receptors.
Hepatocytes were isolated from normal livers by the two-step in situ collagenase perfusion. Hepatocytes at a cell density of 3.3×104 cells/cm2 were plated and allowed to attach for 3 h. After changing medium, the hepatocyte were cultured with selective signal transducer inhibitors in the presence of 5-HT or selective 5-HT2B receptor agonist (BW723C86). TGF-α levels were determined with an ELISA kit (Calbiochem Co.).
TGF-α levels in the culture medium increased significantly versus baseline within 5 min in response to 5-HT or BW723C86, and the maximum TGF-α level was reached 10 min after 5-HT or BW723C86 stimulation. Secretion of TGF-α into the culture medium was inhibited by addition of the selective 5-HT2B receptor antagonist (LY272015), phospholipase C (PLC) inhibitor (U-73122), intracellular Ca2+ chelator (BAPTA/AM) and somatostatin. Moreover, in addition to the above inhibitors, receptor tyrosine kinases (RTK) inhibitor (AG1478), phosphatidylinositol 3-kinase (PI3K) inhibitor (LY294002), mitogen-activated protein extracellular kinase (MEK) inhibitor (PD98059) and mammalian target of rapamycin (mTOR) inhibitor (rapamycin) completely inhibited the 5-HT- or BW723C86-induced hepatocyte mitogenesis without affecting culture medium TGF-α levels.
In conclusion, our data indicate that stimulation of the serotonin 5-HT2B receptor subtype induced PLC activation, possibly via Gq protein, which increases intracellular Ca2+ levels, resulting in autocrine TGF-α secretion. The secreted TGF-α then induced hepatocyte DNA synthesis and proliferation by activating a secondary pathway, the EGF/TGF-α RTK/PI3K/ MEK/mTOR pathway. -
セロトニンの肝実質細胞増殖促進作用に対する増殖関連シグナル伝達因子活性の経時的変化の検討
栗原一樹、内藤浩太、茂木肇、木村光利、荻原政彦
日本薬学会 第138年会(金沢) 日本薬学会
Event date: 2018.03
Language:Japanese Presentation type:Poster presentation
Venue:もてなしドーム(金沢)
【目的】当研究室では、肝再生現象のin vitroモデル実験系としてラット初代培養肝実質細胞実験系を独自に開発し、これまでにいくつかの増殖因子やサイトカインによる肝実質細胞増殖促進作用機構について詳しく研究してきた。一連の研究の中で、オータコイドの一種であるセロトニン(5-hydroxytryptamine ; 5-HT)が、単独で肝実質細胞のDNA合成能を増加させ、細胞増殖を促進することを見出した。さらに、5-HTの肝実質細胞増殖促進作用は、receptor tyrosine kinase(RTK)、MAPK/ERK kinase(MEK)、mammalian target of rapamycin(mTOR)等が深く関与することが明らかとなった。そこで、本研究では、5-HT刺激による上記のようなシグナル伝達因子のリン酸化活性を経時的に追跡することで、各因子間における活性化の順序を推測し、5-HT受容体から肝実質細胞増殖に至る経路を検討した。
【方法】In situコラゲナーゼ還流法により、成熟ラットから肝実質細胞を単離・精製し、初代培養を行った。細胞接着後、無血清培地に交換し、5-HTなどの試薬を添加した。一定時間培養後、細胞を回収し、SDS-PAGEによりタンパク質を分離し、western blot解析法によりタンパク質のリン酸化活性を評価した。
【結果及び考察】5-HT刺激により肝実質細胞のEGF/TGF-α RTK、MAPK、p70S6Kにリン酸化活性が認められた。これらタンパク質のリン酸化活性は、5-HT刺激後それぞれ約10分、約20分、30分で一過性のピークが認められた。また、AG1478は、EGF/TGF-α RTK、MAPK、p70S6Kを、PD98059は、MAPK、p70S6K を、ラパマイシンは、p70S6Kをそれぞれ抑制した。以上のことから、5-HTの肝実質細胞増殖シグナルは、EGF/TGF-α-RTK、MAPK、p70S6Kの順に進むと推測された。 -
セロトニンによるEGFR/MAPK経路の活性化に対する特異的シグナル伝達因子阻害薬の効果の検討
内藤浩太、栗原一樹、茂木肇、木村光利、荻原政彦
日本薬学会 第138年会(金沢) 日本薬学会
Event date: 2018.03
Language:Japanese Presentation type:Poster presentation
Venue:もてなしドーム(金沢)
【目的】当研究室では、肝再生現象のin vitroモデル実験系としてラット初代培養肝実質細胞実験系を独自に開発し、いくつかの増殖因子やサイトカインによる肝実質細胞増殖促進作用機構について詳しく研究してきた。一連の研究の中で、我々は、オータコイドの一種であるセロトニン(5-HT)が単独で肝実質細胞のDNA合成能を上昇させ、細胞増殖を促進することを見出した。そこで、本研究では、5-HTによる増殖に関連したタンパク質(mitogen-activated protein kinase(MAPK)やp70 ribosomal S6 kinase(p70S6K)など)のリン酸化活性の変化をwestern blot解析法を用いて検出し、より詳細な細胞増殖促進機構を検討した。
【方法】In situコラゲナーゼ還流法により、成熟ラットから肝実質細胞を単離・精製し、初代培養を行った。細胞接着後、無血清培地に交換し、5-HTなどの試薬を添加した。一定時間培養後、細胞を回収し、SDS-PAGEによりタンパク質を分離し、western blot解析法によりタンパク質のリン酸化活性を評価した。
【結果及び考察】5-HTは、EGF/TGF-α receptor tyrosine kinase(RTK)、MAPK、p70S6Kのリン酸化活性を有意に増加した。また、これらのリン酸化活性はLY272015(選択的5-HT2B受容体遮断薬)により完全に抑制された。さらに、U-73122(phospholipase C (PLC)阻害薬)、BAPTA/AM(細胞内Ca2+キレート剤)、AG1478(RTK阻害薬)も同様に5-HT誘発EGF/TGF-α RTK、MAPK、p70S6Kのリン酸化活性を完全に抑制した。以上のことから、5-HTの肝実質細胞増殖促進シグナルとしては、少なくともEGF/TGF-α RTK、MAPK及びp70S6Kを介していると推測された。また、これらのリン酸化活性には5-HT2B受容体、PLCの活性化、細胞内Ca2+濃度の上昇が深く関与していることが明らかとなった。 -
アセトアミノフェン誘発肝障害マウスにおけるシステインの 肝障害抑制作用に関する検討
木下和、石井梨恵、仲村翔太郎、青柳颯太、内藤浩太、茂木肇、木村光利、荻原政彦
第61回日本薬学会関東支部大会 日本薬学会関東支部
Event date: 2017.09
Language:Japanese Presentation type:Poster presentation
Venue:慶応義塾大学薬学部
システイン及びグリシンは、グルタチオンを構成する内の一種である。グルタチオンは、フリーラジカルの捕捉、酸化還元による細胞機能の調節、各種酵素のSH供与体であり、抗酸化成分としても知られる。つまり、細胞内のグルタチオン濃度を高めることにより、ミトコンドリアや細胞が、活性酸素による障害から、抗酸化作用によって防御される。またシステインは、四塩化炭素(CCl4)やブロムベンゼン(BrBz)誘発肝障害ラットに対し、また、グリシンはガラクトサミン肝炎ラットに対して、抗炎症作用による肝障害軽減効果を示すことが報告されている。そこで、本研究では、アセトアミノフェン(APAP)による肝障害に対し、システイン及びグリシンが肝障害抑制作用を示すか否か、血清トランスアミナーゼを測定することで検討することを目的とした。 -
ラット初代培養肝実質細胞におけるEGF誘発細胞増殖促進作用に対する カルバコールの抑制効果に関する研究
小鷹麻衣、河原井珠美、鈴木里奈、杉谷幸子、 内藤浩太、茂木肇、木村光利、荻原政彦
第61回日本薬学会関東支部大会 日本薬学会関東支部
Event date: 2017.09
Language:Japanese Presentation type:Poster presentation
Venue:慶応義塾大学薬学部
【目的】当研究室では、肝再生現象の解明の一端として、様々な増殖因子およびサイトカインの増殖のメカニズムについてラット初代培養肝実質細胞系を用いて検討してきた。一連の研究の中で我々はアセチルコリン誘導体のカルバコール(CCh)がEGFの肝実質細胞増殖促進作用を抑制することを見出した。そこで、本研究では成熟ラット初代培養肝実質細胞についてCChがどのようなシグナルを介してEGFの増殖シグナルを抑制しているのかを特異的シグナル伝達因子阻害薬を用いて検討した。
【方法】in situコラゲナーゼ還流法を用いてWistar系雄性ラットの肝実質細胞を単離、精製しコラーゲンコートされたプラスチックディッシュに播種し、37℃、5%CO2条件下で3時間培養した。細胞接着後、無血清培地(MEM(-))に交換し、種々の薬物を添加し、一定時間培養した。培養後、リン酸緩衝生理食塩水(PBS)で接着している細胞を洗浄し、Triton X-100含有0.1Mクエン酸溶液で細胞膜を溶解し、裸核を得た。これをトリパンブルー溶液で核を染色し、血球計算盤を用いて核数を計測した。
【結果・考察】EGF誘発肝実質細胞細胞増殖促進作用は、カルバコール(CCh)の用量に依存して抑制された。その抑制効果はM3受容体阻害薬(1-Benzyl-3-hydroxy piperidine)、U73122、GF109203Xで抑制された。少なくともM3受容体、ホスホリパーゼC(PLC)、プロテインキナーゼC(PKC)が関与していることが示された。 -
ラット初代培養肝実質細胞におけるインターロイキン1βの増殖促進作用機構に関する検討
内藤 浩太、茂木 肇、木村 光利、荻原 政彦
日本薬学会第137年会 日本薬学会
Event date: 2017.03
Language:Japanese Presentation type:Poster presentation
【目的】当研究室では、肝再生現象のin vitroモデル実験系としてラット初代培養肝実質細胞実験系を独自に開発し、これまでにいくつかの増殖因子やサイトカインによる肝実質細胞増殖促進作用機構について詳しく研究してきた。一連の研究の中で、我々は、炎症性サイトカインの一種であるインターロイキン1(IL-1)に着目した。IL-1は、構造上の違いからIL-1α、IL-1β、IL-1raに分類され、主に肝臓のクッパー細胞から産生される。IL-1は感染症や炎症に関与するほか、細胞増殖の調節において重要な役割を示すといわれており、初代培養肝実質細胞においてもIL-1のDNA合成促進作用や細胞増殖促進作用がいくつか報告されている。しかし、詳しい作用機構は明らかになっていない。そこで、我々は初代培養肝実質細胞におけるIL-1のDNA合成及び細胞増殖促進作用のシグナル伝達作用機構を検討した。
【方法】In situコラゲナーゼ還流法により、成熟ラットから肝実質細胞を単離・精製し、初代培養を行った。細胞接着後、無血清培地に交換し、種々の濃度のIL-1または特異的シグナル伝達因子阻害薬を添加した。一定時間培養後、肝実質細胞のDNA合成能及び核数を計測した。
【結果及び考察】IL-1βは用量及び培養時間依存的に有意なDNA合成促進及び細胞増殖促進作用を示した。一方、IL-1αは肝実質細胞における増殖促進作用に対して影響を及ぼさなかった。また、IL-1受容体アンタゴニストであるIL-1ra、U-73122、AG1478、LY294002、PD98059、ラパマイシンはそれぞれIL-1βによる肝実質細胞のDNA合成促進及び増殖促進作用を完全に抑制した。このことから、IL-1βによる肝実質細胞増殖促進作用は、少なくともIL-1β受容体を介し、phospholipase C (PLC)、receptor tyrosine kinase、phosphatidylinositol 3-kinase (PI3K)、MAPK/ERK kinase (MEK)、mammalian target of rapamycin (mTOR)が深く関与していることが明らかとなった。 -
Effect of serotonin on phosphorylation of extracellular signal-regulated kinase in primary cultures of adult rat hepatocytes.
Hajime Moteki, Kota Naito, Mitsutoshi Kimura, Masahiko Ogihara
第90回日本薬理学会年会 日本薬理学会
Event date: 2017.03
Language:English Presentation type:Poster presentation
Venue:長崎ブリックホール
The involvement of extracellular signal-regulated kinase (ERK) in the serotonin (5-HT)-induced hepatocyte DNA synthesis and proliferation was investigated by using western blot analysis in primary cultures of adult rat hepatocytes. A phosphorylated ERK2, but not ERK1, was significantly induced after 20 min stimulation, peaking at 30 min after addition of 5-HT or selective 5-HT2B receptor agonist, BW723C86. The 5-HT- or BW723C86-induced ERK2 phosphorylation was completely inhibited by 5-HT2B receptor antagonist (LY272015), PLC inhibitor (U-73122) and RTK inhibitor (AG1478), PI3K inhibitor (LY294002) and MEK inhibitor (PD98059). On the other hand, mTOR inhibitor (rapamycin), which inhibited hepatocyte DNA synthesis and proliferation induced by 5-HT or BW723C86, did not affect the phosphorylation of ERK2 induced by 5-HT or BW723C86. These results suggest that the proliferative mechanism of action of 5-HT is mediated mainly through 5-HT2B receptor/Gq/PLC and EGF/TGF-alpha RTK/PI3K/ERK2/mTOR signaling pathways. In addition, the results also suggest that these signal transducers are upstream elements of ERK2, and mTOR is a downstream element of ERK2.
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Serotonin-induced hepatocyte mitogenesis is mediated by epidermal growth factor /transforming growth factor-alpha receptor tyrosine kinase pathway.
Kota Naito, Hajime Moteki, Mitsutoshi Kimura, Masahiko Ogihara
第90回日本薬理学会年会 日本薬理学会
Event date: 2017.03
Language:English Presentation type:Poster presentation
Venue:長崎ブリックホール
The involvement of epidermal growth factor (EGF)/ transforming growth factor (TGF)-alpha receptor tyrosine kinase (RTK) in the serotonin (5-HT)-induced DNA synthesis and proliferation was investigated by using western blot analysis in primary cultures of adult rat hepatocytes. Both 5-HT and selective 5-HT2B receptor agonist, BW723C86, stimulated phosphorylation of EGF/TGF-alpha RTK. 5-HT- or BW723C86-induced EGF/TGF-alpha RTK phosphorylation was completely inhibited selective 5-HT2B receptor antagonist (LY272015), PLC inhibitor (U-73122) and RTK inhibitor (AG1478). On the other hand, 5-HT2B receptor agonist-induced EGF/TGF-alpha RTK phosphorylation was not affected by specific inhibitors of growth-related signal transducers (e.g., PD98059, LY294002 and rapamycin) which inhibited hepatocyte proliferation induced by 5-HT or BW723C86. These results suggest that the mechanism of action of 5-HT is mediated mainly through 5-HT2B receptor-stimulated Gq/PLC, which, in turn, lead to the activation of EGF/TGF-alpha RTK and PI3K/MAPK/mTOR signaling pathways in primary cultured hepatocytes.
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70%部分肝切除ラットにおける血清アミノ酸の変動に関する検討
阪本 恵、田中 里、内藤 浩太、茂木 肇、木村 光利、荻原 政彦
第60回日本薬学会関東支部大会 日本薬学会関東支部
Event date: 2016.09
Language:Japanese Presentation type:Poster presentation
Venue:東京大学大学院薬学系研究科、山上会館
【目的】肝再生時の肝臓は、増殖因子やサイトカインだけでなく、ホルモンやビタミン、アミノ酸などの影響も受けることが知られている。近年、アミノ酸による肝細胞増殖促進作用が注目されており、当研究室では、初代培養肝実質細胞において、分岐鎖アミノ酸のうちロイシンにのみ細胞増殖促進作用があることを見出した。肝障害時の血中アミノ酸量の変動に関しては、分岐鎖/芳香族アミノ酸比の低下が知られているが、その他のアミノ酸の血中濃度推移は明らかになっていない。そこで、本実験では、肝再生モデルである70%部分肝切除ラットを用いて、様々なアミノ酸の血清濃度を定量し、肝切除後のアミノ酸の経時的な変動を検討した。
【方法】ラット(Wistar系、雄性)にエーテル麻酔下で70%部分肝切除術を施行し、切除前を0時間として、一定期間飼育した。その後、下大静脈より採血を行い、得られた血清を除タンパクし、4-fluoro-7-nitorobenzofurazan(NBD-F)でアミノ酸を誘導体化した後、高速液体クロマトグラフィーを用いて血清のアミノ酸を定量した。
【結果・考察】測定したほとんどの血清アミノ酸濃度は、切除前と比べて肝切除後早期に上昇傾向を示した。このうちロイシン、グルタミン、プロリン、グリシンが切除前に対して有意に上昇し、リジンは切除前に対して変化を示さなかった。以上より切除後早期に上昇したアミノ酸は、肝再生初期に肝細胞の増殖に影響を及ぼしている可能性が考えられる。 -
セロトニンの成熟ラット初代培養肝実質細胞における細胞増殖促進機構に関する検討
内藤 浩太、茂木 肇、木村 光利、荻原 政彦
日本薬学会第136年会 日本薬学会
Event date: 2016.03
Language:Japanese Presentation type:Poster presentation
Venue:パシフィコ横浜
【目的】当研究室では、肝再生現象のin vitroモデル実験系としてラット初代培養肝実質細胞実験系を独自に開発し、いくつかの増殖因子(上皮成長因子;EGF、肝細胞増殖因子;HGFなど)について、肝実質細胞に対する増殖促進作用、増殖抑制作用あるいは増殖修飾作用などを詳しく研究してきた。一連の研究の中で、我々は、オータコイドであるセロトニン(5-HT)に着目した。セロトニンは、抗うつ作用や血小板凝集、腸の蠕動運動亢進などマルチな作用を示す生理活性物質であり、生体の恒常性維持に寄与している。近年では5-HTによる細胞増殖促進作用が様々な細胞において報告されているが、詳しい作用メカニズムに関しては解明されていない。そこで本研究では、成熟ラット初代培養肝実質細胞を用いて5-HTによる肝細胞増殖促進作用機構をDNA合成能及び肝実質細胞の核数を計測することにより検討した。
【方法】In situコラゲナーゼ還流法により、成熟ラットから肝実質細胞を単離し、初代培養を行った。細胞接着後、無血清培地に交換し、種々の濃度の5-HTまたは特異的シグナル伝達因子阻害薬を添加した。一定時間培養後、肝実質細胞のDNA合成能及び核数を計測した。
【結果及び考察】5-HTは、肝実質細胞に対して、用量及び培養時間に依存して有意な細胞増殖促進作用を示した。更に、その細胞増殖促進作用は、AG1478、LY294002、PD98059、ラパマイシンにより各々完全に抑制されたことから、5-HTによる肝実質細胞増殖促進作用には、少なくとも受容体tyrosine kinase、phosphoinositide 3-kinase(PI3K)、MAPK/ERK kinase(MEK)、mammalian target of rapamycin(mTOR)が深く関与していることが明らかとなった。 -
ラット初代培養肝実質細胞に対するインターロイキン1βの細胞増殖 促進作用はトランスフォーミング増殖因子αの分泌を介している
茂木 肇、木村 光利、荻原 政彦
第89回 日本薬理学会年会 日本薬理学会
Event date: 2016.03
Language:Japanese Presentation type:Poster presentation
Venue:パシフィコ横浜
We investigated the effects of interleukin-1β(IL-1β) on DNA synthesis and proliferation in primary cultures of adult rat hepatocytes in order to elucidate the intracellular signal transduction pathways. The results showed that hepatocyte parenchymal cells maintained in a serum-free, defined medium synthesized DNA and proliferated in the presence of IL-1β in a time- and dose-dependent manner, which were inhibited by a selective IL-1β receptor antagonist IL-1ra (20 ng/ml), phospholipase C (PLC) inhibitor U-73122 (10-6 M), and somatostatin (10-6 M). Addition of a monoclonal antibody against transforming growth factor (TGF)-α, but not a monoclonal antibody against insulin-like growth factor-I, to the culture dose-dependently inhibited IL-1β(10 ng/ml)-induced hepatocyte mitogenesis. Culture medium TGF-α levels increased significantly within 3 min in response to IL-1β (10 ng/mL) from baseline levels. Peak TGF-α levels (33 pg/ml) were reached at 10 min after IL-1β stimulation. These results indicate that the proliferative mechanism of action of IL-1β is mediated through an increase in autocrine secretion of TGF-α from primary cultured hepatocytes.
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ラット初代培養肝実質細胞に対するインターロイキン1βの増殖促進作用の検討
内藤 浩太、茂木 肇 、木村 光利、荻原 政彦
第89回 日本薬理学会年会 日本薬理学会
Event date: 2016.03
Language:Japanese Presentation type:Poster presentation
Venue:パシフィコ横浜
We studied the effects of interleukin 1β (IL-1β on DNA synthesis and cell proliferation in primary cultures of adult rat hepatocytes in order to elucidate the mechanisms of its action. Hepatocyte parenchymal cells maintained in a serum-free, defined medium synthesized DNA and proliferated in the presence of IL-1β (3-30 ng/mL), but not IL-1α (0.1-30 ng/mL) in a time- and dose-dependent manner. A selective IL-1β receptor antagonist, IL-1ra (20 ng/ml) and a specific phospholipase C (PLC) inhibitor, U-73122 (10-6 M) as well as specific inhibitors of growth-related signal transducers, such as, AG1478, LY294002, PD98059, and rapamycin completely inhibited the IL-1β (10 ng/ml)-induced hepatocyte DNA synthesis and proliferation. Western blot analysis showed that IL-1β significantly stimulated phosphorylation of EGF/TGF-α receptor tyrosine kinase (RTK) (p175 kDa) and extracellular-signal regulated kinase-2(ERK-2) activation within 10 min. These results suggest that the proliferative mechanism of action of IL-1β is mediated mainly through IL-1β receptor-stimulated Gq/PLC and EGF/TGF-α-RTK/PI3K/ERK2/mTOR signaling pathways in primary cultured hepatocytes.
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70%部分肝切除ラットにおけるプロスタグランジンE2の肝再生促進作用に関する組織化学的研究
内藤 浩太、北澤 知英、茂木 肇、木村 光利、荻原 政彦
第132回日本薬理学会関東支部会 日本薬理学会関東支部
Event date: 2015.07
Language:Japanese Presentation type:Poster presentation
Venue:明海大学浦安キャンパス
【目的】当研究室では、肝再生現象のin vitroモデル系として初代培養肝実質細胞を用いて、肝再生を促進する薬物の探索を行ってきた。その一連の研究の中で、プロスタグランジンE₂(PGE₂)が単独で肝実質細胞の増殖を促進させることを見出した。そこで、本研究では、in vivo実験系である70%部分肝切除ラットを用いてPGE₂による肝再生促進作用を検討するために、肝重量変化、DNA合成能、血清トランスアミナーゼ活性を測定した。なお、DNA合成能に対するPGE₂の効果は、DNA合成期(S期)の核に特異的に取り込まれた5-bromo-2'-deoxyuridine(BrdU)を免疫組織化学的手法により測定することにより評価した。
【方法】ラット(Wistar系、雄性)にエーテル麻酔下で70%部分肝切除術を施行し、術直後より、PGE₂を1日1回腹腔内投与した。術後、一定期間経過したモデル動物にBrdU(50 mg/kg,i.p.)を投与し、残余肝を摘出し、その肝重量を測定した。その後、摘出した残余肝は、ホルマリン固定、パラフィン包埋した後、ミクロトームにより薄切して組織切片を作成した。S期の核に取り込まれたBrdUは、BrdU Immunohistochemistry Kit(Exalpha Biologicals社)を用いて染色し、その染色された細胞割合(Labeling Index;LI)を計測した。
【結果及び考察】70%部分肝切除ラットに対して、PGE₂(10 μg/kg,i.p.)投与群では、術後3日目においてcontrol(0.2%エタノール)群と比較して有意な肝重量の増加が認められた。一方、DNA合成能の変動は、術後1日目において一過性のピークが認められ、術後1日目のLIは、PGE₂(10 μg/kg,i.p.)投与群においてcontrol群に対し、約2.3倍と有意な上昇を示し、DNA合成能の促進が認められた。また、血清トランスアミナーゼ活性は、PGE₂(10 μg/kg,i.p.)投与群において術後2日目、3日目でcontrol 群に対し、有意な低下を示した。以上の結果より、PGE₂は、70%部分肝切除ラットにおいて、術後早期から肝実質細胞のDNA合成能を有意に上昇させ、肝再生を促進することが示された。 -
L-Ascorbic acid and its analogs accelerate in vivo liver regeneration in 70% partially hepatectomized rats.
Event date: 2015.03
Language:Japanese Presentation type:Poster presentation
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Signal transduction mechanism for potential by α1- and β2-adrenergic agonists of l-ascorbic acid-induced DNA synthesis and proliferation in primary cultures of adult rat hepatocytes.
Event date: 2015.03
Language:Japanese Presentation type:Poster presentation
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70%部分肝切除マウスにおけるカルバコールの肝再生促進作用に関する研究
野呂 昌代、矢田 祐平、茂木 肇、木村 光利、荻原 政彦
第58回日本薬学会関東支部大会 日本薬学会関東支部
Event date: 2014.10
Language:Japanese Presentation type:Poster presentation
Venue:昭和薬科大学
【目的】当研究室では、従来から肝再生現象のin vivoモデル系として70%部分肝切除マウスを用い、肝再生を促す薬物の探索などを行ってきた。一連の研究で、カルバコールに注目した。近年、カルバコールは肥満モデル動物において肝細胞核抗原の増加作用を示すことが報告されている。そこで、本研究では、70%部分肝切除マウスに対するカルバコールの肝再生促進作用を検討するため、肝重量の測定およびBrdUを用いた免疫組織化学的手法によるDNA合成能の測定を行った。
【方法】マウス(ddY系、雄性)にエーテル麻酔下で70%部分肝切除術を施行した。術直後より、カルバコールを1日1回腹腔内投与した。術後、一定期間経過したモデル動物にBrdU(50 mg/kg, i.p.)を投与し、肝重量を測定した。摘出した肝臓は、ホルマリン固定後、パラフィン包埋し、ミクロトームにより薄切して組織切片を作成した。S期の核に取り込まれたBrdUはBrdU Immunohistochemistry kit(Exalpha Biologicals)により染色し、その染色された割合(Labeling index ;LI)を計測した。
【結果及び考察】70%部分肝切除後の残余肝重量は、カルバコール投与により早期から用量に依存して増加した。また、DNA合成能の変動は、術後1.5~2日目においてLIの一過性のピークが認められた。Control群(生理食塩水投与)のLIは1.5日目で6.6%であったのに対し、カルバコール投与群のLIは10.4%であり、DNA合成能の有意な上昇が認められた。これらの結果から、カルバコールは、70%部分肝切除マウスにおいて、術後早期から肝実質細胞のDNA合成能を優位に上昇させ、肝再生を促進することが示された。 -
70%部分肝切除ラットにおけるプロスタグランジンE2の肝再生促進作用に関する組織化学的研究
内藤 浩太、北澤 知英、茂木 肇、木村 光利、荻原 政彦
第58回日本薬学会関東支部大会 日本薬学会関東支部
Event date: 2014.10
Language:Japanese Presentation type:Poster presentation
Venue:昭和薬科大学
【目的】当研究室では、肝再生現象のin vitroモデル系としての初代培養肝実質細胞を用いて、肝再生を促進する薬物の探索を行ってきた。その一連の研究の中で、プロスタグランジンE₂(PGE₂)について検討したところ、我々は、PGE₂が単独で肝実質細胞の増殖を促進させることを見出した。そこで、本研究では、in vivo実験系である70%部分肝切除ラットにおいて、PGE₂による肝再生促進作用を検討するため、DNA合成期(S期)の核に特異的に取り込まれた5-bromo-2'-deoxyuridine(BrdU)を免疫組織化学的手法により測定することにより、DNA合成能に対するPGE₂の効果を評価した。
【方法】ラット(Wistar系、雄性)にエーテル麻酔下で70%部分肝切除術を施行し、術直後より、PGE₂を1日1回腹腔内投与した。術後、一定期間経過したモデル動物にBrdU(50
mg/kg,i.p.)を投与し、肝重量を測定した。その後、摘出した残余肝臓は、ホルマリン固定、パラフィン包埋した後、ミクロトームにより薄切して組織切片を作成した。S期の核に取り込まれたBrdUは、BrdU Inmunohistochemistry Kit(Exalpha Blologlcals)により染色し、その染色された割合(Labeling Index;LI)を計測した。
【結果及び考察】70%部分肝切除ラットに対して、PGE₂(10 μg/kg,i.p.)投与群では術後3日目においてcontrol(0.2%エタノール)群と比較すると有意な肝重量の増加が認められた。一方、DNA合成能の変動は、術後1日目において一過性のピークが認められ、術後1日目のLIは、control群が9.8%であったのに対し、PGE₂(10 μg/kg,i.p.)投与群は22.5%とDNA合成能の有意な上昇を示した。以上の結果より、PGE₂は、70%部分肝切除ラットにおいて、術後早期から肝実質細胞のDNA合成能を有意に上昇させ、肝再生を促進することが示された。 -
Vitamin C induced cell proliferation in primay cultures of adult rat hepatocytes : The involvement of insulin-like growth factor-I recepter.
Event date: 2014.03
Language:Japanese Presentation type:Poster presentation
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70%部分肝切除マウスにおけるS-Allyl-L-Cysteineの肝再生促進作用の検討
鎌苅 紗綾、茂木 肇、木村 光利、荻原 政彦
第57回日本薬学会関東支部大会 日本薬学会関東支部
Event date: 2013.10
Language:Japanese Presentation type:Poster presentation
Venue:帝京大学板橋キャンパス
【目的】当研究室では、従来から肝再生現象のin vivoモデル系として、70%部分肝切除ラットを用いて、肝再生を促す薬物の探索などを行ってきた。一連の研究の中で、水溶性含硫アミノ酸であるS-Allyl-L-Cysteine(ACys)に注目した。近年、ACysが神経細胞や表皮細胞などの増殖に関与していることが報告されている。そこで、本研究では、in vivo実験系の70%部分肝切除マウスを用いてACysによる肝再生促進作用を検討した。
【方法】マウス(ddY系、雄性)に70%部分肝切除術を施行し、術直後より、ACysを1日1回腹腔内投与して、術後1-5日目における肝臓の再生割合をcontrol(生理食塩水)群と比較した。また、マウスの門脈より採血し、血清トランスアミナーゼ(AST、ALT)活性値も測定した。【結果及び考察】70%部分肝切除後の肝重量の経時的変化において、control群は術後1日目から肝重量が増加し始め、術後5日目には切除前の元の肝重量にまで回復した。ACys群では、control群よりも早期に肝重量の増加が見受けられ、術後4日目におけるマウス体重10gあたりの肝重量は、control群0.36 gであるのに対し、ACys群は0.43 gと、ACys投与により、術後4日目で切除前の元の肝重量まで回復した。一方、ACys投与における70%部分肝切除マウスの血清AST及びALT活性は、共にcontrol群と大きな差は認められなかった。これらの結果により、ACysは、70%部分肝切除マウスの肝重量を、術後早期から有意に増加させたことから、肝再生を促進させることが示された。 -
アスコルビン酸2グルコシドのラット初代培養肝実質細胞増殖促進作用に対するアドレナリン作動性調節機構の検討
浅見 和希、茂木 肇、木村 光利、荻原 政彦
第57回日本薬学会関東支部大会 日本薬学会関東支部
Event date: 2013.10
Language:Japanese Presentation type:Poster presentation
Venue:帝京大学板橋キャンパス
【目的】当研究室では、アドレナリン受容体作動薬と増殖因子(肝細胞増殖因子など)との受容体を介するシグナル伝達系との関連(cross-talk)について、成熟ラット初代培養肝実質細胞系を用いて検討してきた。その結果、α1およびβ2作動薬は、単独では、肝実質細胞の増殖に影響を与えないが、増殖因子との共存下で、増殖因子の増殖促進作用を増強させることを見出した。一方、我々は、L-アスコルビン酸2グルコシド(AsA2G)が、IGF-I受容体を介して、肝実質細胞の増殖を促進させることも見出した。そこで、今回アドレナリン受容体作動薬が、AsA2Gによる肝実質細胞増殖促進作用にどのような影響を及ぼすのかを検討した。
【方法】in situコラゲナーゼ還流法により、成熟ラットから肝実質細胞を単離し、初代培養を行った。細胞接着後、無血清培地に交換し、種々の濃度のAsA2G及び特異的シグナル伝達因子阻害薬を添加した。培養終了後、肝実質細胞のDNA合成能及び核数を計測した。
【結果および考察】初代培養肝実質細胞をAsA2G単独で刺激すると、培養時間に依存して肝実質細胞のDNA合成能および核数の増加が認められた。更に、このAsA2Gにより誘発された肝実質細胞のDNA合成能および核数の増加は、α1またはβ2作動薬の共存下で増強された。一方、α1およびβ2作動薬は、単独では肝実質細胞のDNA合成能および核数に影響を及ぼさなかった。これらの結果から、AsA2Gによる肝実質細胞増殖促進作用は、α1およびβ2作動薬により増強されることが示された。 -
ラット初代培養肝実質細胞におけるアスコルビン酸2グルコシドのMAPキナーゼ活性に対するアドレナリン作動性調節機構の検討
大沼 弘和、茂木 肇、木村 光利、荻原 政彦
第57回日本薬学会関東支部大会 日本薬学会関東支部
Event date: 2013.10
Language:Japanese Presentation type:Poster presentation
Venue:帝京大学板橋キャンパス
【目的】当研究室では、アドレナリン受容体作動薬と増殖因子(肝細胞増殖因子など)の受容体を介するシグナル伝達系との関連(cross-talk)について、成熟ラット初代培養肝実質細胞系を用いて検討してきた。その結果、α1及びβ2 作動薬は、単独では、肝実質細胞の増殖に影響を与えないが、増殖因子との共存下で、増殖因子の増殖促進作用を増強させることを見出した。一方、我々は、L-アスコルビン酸2グルコシド(AsA2G)が、IGF-I受容体を介して、肝実質細胞の増殖を促進させることも見出した。そこで、α1及びβ受容体を介する肝実質細胞増殖修飾作用が、AsA2Gのシグナル伝達機構のどの部分と相互作用をしているのかを、IGF-I受容体チロシンキナーゼ(IGF-I-RTK)およびMAPキナーゼ(MAPK;ERK1/ERK2)の活性を直接測定することにより、検討した。
【方法】AsA2Gとα1及びβ2作動薬との共存下における初代培養肝実質細胞のIGF-I-RTK及びMAPK活性を、抗リン酸化IGF-I-RTK、ERK1/ERK2抗体を用いたWestern blot 解析法にて測定し、そのリン酸化活性を比較検討した。
【結果および考察】初代培養肝実質細胞をAsA2G単独で刺激すると、培養開始3~5分でピークとなる一過性のIGF-I-RTKおよびERK2リン酸化活性の上昇が発現した。更にERK2リン酸化活性はα1及びβ2作動薬の共存下で増強された。これらの結果から、肝実質細胞におけるAsAの肝実質細胞増殖促進シグナルは、IGF-I-RTKの下流からERK2の上流の間でα1及びβ2アドレナリン作動性増強を受けていることが示された。 -
70%部分肝切除マウスにおけるロイシンの肝再生促進作用の検討
阿部 拓也、茂木 肇、木村 光利、荻原 政彦
第57日本薬学会関東支部大会 日本薬学会関東支部
Event date: 2013.10
Language:Japanese Presentation type:Poster presentation
Venue:帝京大学板橋キャンパス
【目的】当研究室では、従来から肝再生現象のin vivoモデル系として、70%部分肝切除ラットを用いて、肝再生を促す薬物の探索などを行ってきた。一連の研究の中で、分岐鎖アミノ酸の一つであるロイシン(Leu)に注目した。我々は、Leuによる肝実質細胞の増殖促進作用を、初代培養肝実質細胞を用いたin vitro実験系で証明した。そこで、本研究では、in vivo実験系の70%部分肝切除マウスを用いて、Leuによる肝再生促進作用の有無を検討した。
【方法】マウス(ddY系、雄性)に70%部分肝切除術を施行し、術直後より、Leuを1日1回腹腔内投与して、術後1-5日目における肝臓の再生割合をcontrol(生理食塩水投与)群と比較した。また、マウスの門脈より採血し、血清トランスアミナーゼ(AST、ALT)活性値も測定した。
【結果および考察】70%部分肝切除後の肝重量の経時的変化において、control群は術後1日目から肝重量が増加し始め、術後5日目には切除前の元の肝重量にまで回復した。これに対し、Leu投与群では、control群よりも早期に肝重量の増加が見受けられ、術後4日目におけるマウス体重10gあたりの肝重量は、control群0.38 gであるのに対し、Leu投与群は0.45 gと、Leu投与により、術後4日目で切除前の元の肝重量まで回復した。一方、Leu投与における70%部分肝切除マウスの血清トランスアミナーゼ活性は、術後2日目においてAST、ALT共に有意な低下が認められた。これらの結果により、Leuは、70%部分肝切除マウスの肝重量を術後早期から有意に増加させ、合わせて肝機能も早期に改善させることが示された。 -
70%部分肝切除マウスにおけるアスコルビン酸2グルコシドの肝再生促進作用の検討
大橋 愛、茂木 肇、木村 光利、荻原 政彦
第57回日本薬学会関東支部大会 日本薬学会関東支部
Event date: 2013.10
Language:Japanese Presentation type:Poster presentation
Venue:帝京大学板橋キャンパス
【目的】当研究室では、従来から肝再生現象のin vivoモデル系として、70%部分肝切除ラットを用いて、肝再生を促す薬物の探索などを行ってきた。一連の研究の中で、アスコルビン酸2グルコシド(AsA2G)に注目した。我々は、L-アスコルビン酸の安定型誘導体であるAsA2Gによる肝実質細胞の増殖促進作用を、初代培養肝実質細胞を用いたin vitro実験系で証明した。そこで、本研究では、in vivo実験系の70%部分肝切除マウスを用いてAsA2Gによる肝再生促進作用を検討した。【方法】マウス(ddY系、雄性)に70%部分肝切除術を施行し、術直後より、AsA2Gを1日1回腹腔内投与して、術後1-5日目における肝臓の再生割合をcontrol(生理食塩水)群と比較した。また、マウスの門脈より採血し、血清トランスアミナーゼ(AST、ALT)活性値も測定した。【結果及び考察】70%部分肝切除後の肝重量の経時的変化において、control群は術後1日目から肝重量が増加し、術後5日目には切除前の元の肝重量にまで回復した。AsA2G群では、control群よりも早期から肝重量の増加が見受けられ、術後4日目におけるマウス体重10gあたりの肝重量は、control群が0.39 gであるのに対し、AsA2G群は0.46 gと、AsA2G投与により、術後4日目で切除する前の元の肝重量まで回復した。一方、AsA2G投与における70%部分肝切除マウスの血清ASTおよびALT活性は、共にcontrol群と大きな差は認められなかった。これらの結果より、AsA2Gは、70%部分肝切除マウスの肝重量を術後早期から有意に増加させたことから、肝再生を促進させることが示された
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In vivo L-ascorbic acid and L-ascorbic acid 2-glucoside liver regeneration in 70% partially hepatectomized rats.
Event date: 2013.03
Language:Japanese Presentation type:Poster presentation
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Activation of mitogen-activated protein kinase by L-ascorbic acid is stimulated by both alpha1- and beta2-adrenergic agonists in primary cultures of adult rat hepatocytes.
Event date: 2013.03
Language:Japanese Presentation type:Poster presentation
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Signal transduction pathway for L-ascorbic acid- and L-ascorbic acid 2-glucoside-induced DNA synthesis and cell proliferation in primary cultures of adult rat hepatocytes.
Event date: 2013.03
Language:Japanese Presentation type:Poster presentation
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Effects of L-ascorbic acid on insulin-like growth factor-I receptor tyrosine kinase and mitogen-activated protein kinase activity in primary cultured hepatocytes.
Event date: 2013.03
Language:Japanese Presentation type:Poster presentation
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Vitamin C and its analogue-induced DNA synthesis and proliferation in primary cultures of adult rat hepatocytes.
Mitsutoshi Kimura, Hajime Moteki, Masahiko Ogihara
Event date: 2013.03
Language:Japanese Presentation type:Poster presentation
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Activation of extracellular-signal regulated kinase by epidermal growth factor is potentiated by phenylephrine in primary cultures of adult rat hepatocytes
Hajime Moteki, Mitsutoshi Kimura, Masahiko Ogihara
Event date: 2012.03
Language:Japanese Presentation type:Poster presentation
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Accelerating effect of acyclic retinoid NIK-333 on the restoration of liver mass and recovery if liver function in 70% partially hepatectomized rats.
Mitsutoshi Kimura, Hajime Moteki, Makiko Watanabe, Naoto Ishibashi, Shingo Yanagida, Masahiko Ogihara
Event date: 2012.03
Language:Japanese Presentation type:Poster presentation
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ラット初代培養肝実質細胞における血小板由来成長因子によるMAPキナーゼ活性化に対するアドレナリン作動性調節機構の検討
茂木肇、木村光利、荻原政彦
日本薬学会第131年会(静岡) 日本薬学会
Event date: 2011.03
Language:Japanese Presentation type:Poster presentation
Venue:ツインメッセ静岡
【目的】当研究室では、肝再生現象の解明の一端として、いくつかの成長因子(上皮増殖因子:EGF や肝細胞増殖因子:HGF など)の作用を、成熟ラット初代培養肝実質細胞系を用いて検討してきた。その結果、in vivo の正常な状態の肝臓では、きわめて低くしか発現していなかったアドレナリンα2およびβ受容体が、肝実質細胞を上記の成長因子で初代培養することにより発現してくることをはじめて報告した。さらにα1およびβ2作動薬は、単独では、肝実質細胞の増殖に影響を与
えないが、上記の成長因子との共存下では、成長因子の増殖促進作用を増強させることも見出した。しかし、各成長因子のシグナル伝達機構とこれらのアドレナリン受容体作動薬のそれとの関連(cross-talk)についての詳細は不明である。そこでα1受容体応答が肝細胞の増殖を特に強く促進させる血小板由来増殖因子(PDGF)のシグナル伝達機構のどの部分と相互作用をしているのかを、MAP キナーゼ(MAPK)の活性を直接測定することにより、検討した。
【方法】PDGF とα1およびβ2作動薬との共存下における初代培養肝実質細胞のMAPK 活性を、抗リン酸化ERK1、ERK2抗体を用いたWestern blotting 解析法にて測定し、比較検討した。
【結果および考察】初代培養肝実質細胞をPDGF 単独で刺激することにより、培養開始3分後でピークとなる一過性のERK2活性の上昇が発現した。それらはα1作動薬の共存下で増強され、β2作動薬では影響されなかった。一方、α1およびβ2作動薬単独ではMAPK 活性に変化がなかった。これらの結果から、肝実質細胞におけるPDGF の増強シグナルは、MAPK の上流でα1アドレナリン作動性増強を受けていることが示された。 -
Stimulatory effects of glycyrrhizin on liver regeneration in partially hepatectomized rats
Event date: 2007.03
Language:Japanese Presentation type:Poster presentation
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Leucine-induced DNA synthesis and proliferation in primary cultures of adult rat hepatocytes: The involvement of transforming growth factor-α
Event date: 2006.03
Language:Japanese Presentation type:Poster presentation
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マウス摘出回腸に対するピペリン-シクロデキストリン包接複合体の収縮抑制作用に関する研究
稲垣 友季子、柏葉 希奈美、松本 奈実子、恵沢 敏成、栗原 一樹、茂木 肇、荻原 政彦、井上 裕、木村 光利
第64回日本薬学会関東支部大会 日本薬学会関東支部
Event date: 2020.09
Language:Japanese Presentation type:Poster presentation
Venue:オンライン
【目的】胡椒に含まれるピペリン(PP)は、腸管の蠕動運動を抑制するとして、過敏性腸症候群などの新しい治療薬として期待されている。しかし、PPは難溶性のため、製剤的な工夫が必要である。水への溶解性を高める方法の一つにシクロデキストリン(CD)を用いた包接が挙げられる。CDは、構成するグルコース分子数に応じて、6つのα型、7つのβ型、8つのγ型に分類することができる。本研究では、CDにより包接されたPPが及ぼす腸管収縮抑制作用について、その影響を検討するため、腸管マグヌス法を用いて検証した。
【方法】ddY雄性マウスから摘出した回腸をタイロード液が入ったオルガンバス内に懸垂し、カルバコールで回腸を刺激した。その後、PPやその包接体を添加し、回腸収縮高を測定した。なお、PPの各包接化合物は混合粉砕法(GM)および共沈法(CP)により調製した。
【結果および考察】GM により包接されたPP-CDの腸管収縮抑制率はそれぞれα型が36%、β型が32%、γ型が28%とどれも有意な抑制を示した。更に、α型においてCPにより包接されたPPの抑制率は、62%とGMよりも顕著な上昇が認められた。これにより、PPのCD包接には、グルコース分子数が少ないα型が適していると考えれる。 -
ミグリトール-シクロデキストリン包接化合物の血糖上昇抑制効果に関する検討
田中優弥、栗原一樹、内藤浩太、茂木肇、荻原政彦、木村光利
第62回日本薬学会関東支部大会 日本薬学会関東支部
Event date: 2018.09
Language:English Presentation type:Poster presentation
Venue:帝京平成大学
【背景・目的】臨床では、血糖上昇抑制薬としてα-グルコシダーゼ阻害薬のミグリトール(miglitol : 以下MTと略す)が、主に食後高血糖を改善する目的で用いられる。投与されたMTの大部分は小腸上部で吸収されるため、小腸下部でのα-グルコシダーゼ阻害作用は減弱する。そのため、食後血糖値推移のピークが現れる時間を遅らせるという特徴を持つ。
シクロデキストリン(cyclodextrin、以下CDと略す)は、複数のグルコースがα-1,4結合した環状のオリゴ糖であり、その空洞中に様々な分子を取り込むことで包接化合物を形成することができる。CDには、結合するグルコース数の違いからα-CD、β-CD、γ-CDなどが存在し、構造の違いから消化性や水溶性などの物性が異なる。α-CDは、多糖類やオリゴ糖類による血糖上昇を抑制する作用があり、糖として腸管から吸収されることはない。一方γ-CDは、α-アミラーゼによって分解され、グルコースとして小腸から吸収されることが知られている。
上記の背景から、本研究ではマウスに対するin vivo経口糖負荷試験を行い、α-CDおよびγ-CD単独並びに包接されたMTが糖負荷による血糖値の変動に与える影響について検討した。
【方法】一晩絶食させたddYマウスにスクロースと各薬物(MT、α-CD、γ-CD、包接化合物)の混合液を経口投与し、投与直後から180分まで経時的に尾静脈から採血し、血糖値を測定した。
【結果・考察】今回の研究結果では、低用量のMT(3 mg/kg)をα-CDで包接することで、高用量のMT(10 mg/kg)単独とほぼ同等な血糖上昇抑制作用が得られた。この結果から、MTの投与量が減量でき、肝、腎機能が低下している患者への投与におけるリスクを減少させることが期待できる。一方、γ-CDを用いた実験では、包接型(MT/γ-CD)は、MT単独群と同様に血糖値ピーク時間をcontrol(スクロース単独投与)群よりも後方に移動させたが、MT単独群と比較し、血糖値に明らかな差は認められなかった。このことから、包接型(MT/γ-CD)は、投与後、γ-CDが速やかに分解されることで、MTの包接による徐放効果が得られなかったのではないかと考えられる。 -
オキセサゼイン-γシクロデキストリン抱接化合物のマウス摘出回腸に対する収縮抑制作用に関する研究
金井 里紗、茂木 肇、木村 光利、井上 裕、金本 郁男、荻原 政彦
第59回日本薬学会関東支部大会 日本薬学会関東支部
Event date: 2015.09
Language:Japanese Presentation type:Poster presentation
Venue:日本大学薬学部
【目的】オキセサゼイン(OXZ)は、過敏性腸症候群などに用いられる局所麻酔薬である。その作用はプロカインの4000倍と高力価であるが、欠点として水に難溶である。水への溶解性を高める方法の一つにγシクロデキストリン(γCD)を用いた包接が挙げられる。OXZは、γCDと抱接化合物を形成し、体内に入るとミセル化され吸収される。また、しかし、OXZ-γCD包接化合物による実際の腸管に対する作用は、未だ証明されていない。そこで、本研究では、マグヌス法を用いて、Ach及びBa誘発腸管収縮反応に対するOXZ-γCD抱接化合物の効果を検討した。
【方法】一昼夜絶食させたddy雄性マウスから摘出した回腸を標本として、それをタイロード液が入ったオルガンバス内に懸垂し、Ba2+及びAChで回腸を刺激した。その後、被験薬を添加し、回腸収縮高を測定した。被験薬は各包接化合物調整法別(共沈法(CP)、混合粉砕法(GM)、物理的混合(PM))の溶出試験により得られた溶出液を使用した。
【結果・考察】Ba2+に誘発した回腸収縮反応は、CP、PM、GP共に溶出時間に依存して抑制が見受けられ、特にCPでは顕著であり、溶出時間30分において収縮率が30%まで有意に低下した。この反応はAChによる回腸収縮反応でも同様な傾向が認められたが、包接化合物の収縮抑制効果はBa2+刺激の方が強かった。Ba2+は細胞内Ca2+濃度を上昇させ、平滑筋の収縮を促進するといわれており、OXZは直接細胞内のCa2+流入を抑制していることが考えられる。 -
健康サポート薬局における健康相談会の有用性に関する調査研究
山本雅人、茂木肇、荻原政彦、臼井達洋、木村光利
埼玉医療薬学懇話会第 38 回学術研究講演会 埼玉医療薬学懇話会
Event date: 2018.07
Language:Japanese Presentation type:Oral presentation (general)
Venue:日本薬科大学
【背景、目的】厚生労働省は、医薬分業の原点に立ち返り、日本再興戦略(平成25年6月14日閣議決定)において、「薬局を地域に密着した健康情報の拠点として、一般用医薬品等の適正な使用に関する助言や健康に関する相談、情報提供を行う等、セルフメディケーションの推進のために薬局・薬剤師の活用を促進する。」との内容が盛り込まれた「健康サポート機能を有する薬局(健康サポート薬局)」について提起した。この薬局は、地域住民が気軽に参加できる健康相談会の実施を活動の一つとしている。健康相談会では、骨密度測定、血糖値・コレステロール測定や血管年齢測定を行い、その結果に基づいて、薬剤師や栄養士が薬や健康食品・サプリメントなどの相談を行うとされているが、健康相談会の中で、具体的にどの項目が地域住民に関心があるのかは明確になっていない。そこで本研究では、健康相談会に来局した人が、どの項目に関心があるのかを調査し、どのようにすれば、健康に関する意識が高まるのかを比較検討した。
【方法】有限会社富士薬局主催で行われた健康相談会の参加者を対象とし、研究者が来局者にアンケートを依頼した。アンケート調査は、本研究目的を説明し、理解して同意が得られた参加者に無記名で、その場で記入してもらった。アンケート内容は年代、性別、日頃気をつけていること(血糖値、血圧、コレステロール、食事や睡眠)及び実施した項目の興味深さ(0~5の6段階評価)を設けた。
【結果、考察】本調査において、参加者48人のうち、栄養相談実施者数25人、血管年齢測定実施者数43人、骨密度測定実施者数35人となり、栄養相談の実施者数は他と比べて低い結果となった。これは、薬剤師もしくは栄養士による直接的な相談となるため来局者が相談することを躊躇してしまい、その結果、実施者数が少なくなったと考えられる。次に、各実施項目の興味深さをスコア化しその平均をとった。栄養相談のスコアは1.85点であったのに対し、血管年齢測定4.23点、骨密度測定3.25点、脂質測定3.00点となり、栄養相談のスコアは他の項目と比べて低い結果となった。これは、栄養相談を行う上での待ち時間が要因で興味深さが低くなったとも考えられる。次に、日頃気をつけていることと、相談会で実施した項目のスコアの間に関連性があるのかを調査した。血糖値を気にしている人のスコアは、血圧やコレステロールを気にしている人のスコアに比べて、栄養相談、血糖測定、脂質測定、血管年齢測定に対するスコアが高い傾向が見受けられた。これは、糖尿病治療による通院の中断率が高血圧治療、高脂血症治療による通院の中断率に比べ有意に低いことと相関しており、参加者は糖尿病に対する関心度が高いため、上記の様な結果になったと考えられる。 -
カルシウム拮抗薬とグレープフルーツジュースの相互作用に関する パンフレット配布による教育効果の検討
森崎 佳菜、蛭田美和、茂木肇、中村梨絵、木村光利、白石卓也、荻原政彦
第23回埼玉県薬剤師会学術大会 埼玉県薬剤師会
Event date: 2017.11
Language:Japanese Presentation type:Oral presentation (general)
Venue:埼玉県 県民健康センター
【背景・目的】薬剤師は、患者に医薬品や疾患に関する知識を付けてもらうために、パンフレットなどの紙媒体を用いた啓発活動を行っている。この方法は、患者に様々な情報を効率的に提供できるが、一方的な提供法であるが故に、患者が勘違いをせず、正しい知識を得られているのか疑問が残る。そこで、今回はカルシウム拮抗薬(以下、CCBと略す)とグレープフルーツジュース(以下、GJと略す)の相互作用を題材としたパンフレットを作成し、これを配布することによる教育的効果を検討した。
【方法】2013年11月18日から12月28日の40日間に、薬局アポック三芳店に来局した患者の中で、CCBが処方され、かつ、本研究の目的に同意した患者51名を対象とした。対象者には、先ず、CCBとGJの相互作用に関する問題に答えてもらい、どの程度、知識を有しているか事前に確認した後、CCBとGJの相互作用に関するパンフレットを配布した。その1か月後、同じ対象者に同じ問題を出題し、パンフレット配布により正答率がどの程度変化したかを測定した。なお、パンフレット配布前後の各回答項目の比較は、カイ2乗検定を用い、危険率5%未満を統計上有意とした。
【結果・考察】問題は全部で3問出題(①GJ併用による引き起こされるCCBの降圧作用の増強に関する問題、②GJと同様に注意を要する柑橘類に関する問題、③GJのCYP3A4阻害持続時間に関する問題)した。パンフレット配布により全ての問題において、有意な正答率の上昇が認められた。一方、③GJのCYP3A4阻害持続時間に関する問題に関して、誤答である「2時間」と回答した対象者は、パンフレット配布前後で39.2%から35.3%と大きな変化が認められたなった。これは、対象者(患者)間で「2時間も過ぎれば、GJは消化・吸収され胃の中にはなくなり、GJは消失したはず」と誤った知識が定着したため、パンフレット配布による教育効果が得られなかったと考えられる。このように、患者が誤った先入観を有している場合は、パンフレットによる教育効果が乏しい傾向にあり、パンフレット作成時は、予め患者の先入観を把握する必要があると考えられる。 -
リウマトレックス®による間質性肺炎を例にした重篤な副作用の情報提供に対する非関節リウマチ患者の意識調査
仁宮 勇人、遠藤 栞、茂木 肇、木村 光利、小松 由美子、荻原 政彦
埼玉医療薬学懇話会第 37 回学術研究講演会 埼玉医療薬学懇話会
Event date: 2017.07
Language:Japanese Presentation type:Oral presentation (general)
Venue:東大宮コミュニティセンター
【背景・目的】薬剤師は、薬剤師法第25条の2により情報提供と薬学的知見に基づく指導の義務が課せられている。特に副作用に関する説明は重要であり、副作用の発症率が極めて低い場合でも、患者に適切に説明し、患者から理解と納得を得ることが肝要である。一方、この副作用の説明が、患者の副作用に対する恐怖心を助長し、コンプライアンスの低下を招く恐れがあることも事実であり、現場の薬剤師は、服薬指導の際、患者に誤解を生じさせないよう伝え方に気を配る必要がある。本研究では、リウマトレックス®(メトトレキサート)による間質性肺炎を例にとり、仮想のリウマチ患者が重篤な副作用を伝えられたとき、患者のコンプライアンスにどのような影響を及ぼすのかをアンケートにて調査を行った。
【方法】2015年1月から4月に株式会社ヘルスアップしもふり薬局に来局した患者の中で、本研究の目的に同意した155名を対象とし、対象者には「慢性関節リウマチという病気を患ってしまい、治療のためリウマトレックス®という抗リウマチ薬を服用することになった。」と仮想のリウマチ患者になってもらい、パンフレットを用いて間質性肺炎について説明した。説明後、リウマトレックス®を服用することに対する意識の変化などをアンケート調査をし、その結果を年代別(20~30歳代、40~50歳代、60歳代以上)に分け、それぞれ比較した。なお、実際にリウマトレックス®を服用している患者の影響を避けるため、整形外科領域に受診している患者は対象外とした。
【結果、考察】間質性肺炎の説明を受けた後、リウマトレックス®を服用することに対する患者の意識として、20~30歳代は他の年代と比較して「しっかりとしたデータがあるので安心して服用する」が38.0%と有意に多く、若年層は間質性肺炎に対する抵抗性は低く、リウマトレックス®服用に対しても積極的な意見が多い傾向が認められた。その一方、60歳代以上は「心配なのでできれば服用したくない」といった服薬に対して消極的な意見が35.3%と有意に多く認められた。これらの結果より、年代が上がるにつれて重篤な副作用に対する抵抗性が高くなり、高年齢層の患者はコンプライアンスの低下を示したと考えられる。また、上記のようなリウマトレックス®服用に対して消極的な意見を示した60歳代以上の患者は「しっかりとしたデータがあっても副作用は怖い」という意見が51.1%と多かった。すなわち、60歳代以上の患者は、加齢による処方薬剤数の増加や薬物動態学的変化により副作用を経験することが多くなるため、副作用に対する警戒心が若年者より高いと考えられる。 -
病院における非高齢者のカルシウム拮抗薬服用後の胃腸障害発症率に関する調査研究
星野 広太、茂木 肇、木村 光利、荻原 政彦
埼玉医療薬学懇話会 第36回学術研究講演会
Event date: 2016.07
Language:Japanese Presentation type:Oral presentation (general)
Venue:さいたま市文化センター
【背景・目的】Ca拮抗薬は降圧薬及び狭心症治療薬として、高頻度に使用されている。近年、Ca拮抗薬に、下部食道括約筋へのCa2⁺流入を阻害することで噴門部の括約筋を弛緩させ、胃酸の逆流を起こし上部消化管疾患を誘発させる可能性が報告されている。Hamadaらは、胃酸分泌抑制薬の処方件数をアウトカムとしたCa拮抗薬の上部消化管疾患に対する影響を疫学的に検討した結果、高齢者及び非高齢者のCa拮抗薬服用群の胃酸分泌抑制薬の処方件数が、ARB、ACEI服用群と比較して、有意に高いことを報告した。しかしながら、上述の調査は、胃腸障害の診断を実際に確認することが困難な研究であった。そこで、本研究では、Ca拮抗薬と逆流性食道炎の関係を明確にするため、埼玉県内の病院の電子カルテを用いて、非高齢高血圧患者における各種Ca拮抗薬による逆流性食道炎の発症率、服用期間と逆流性食道炎の発症率の関係等を直接調査することとした。
【方法】埼玉県内の病院を受診した交絡因子の少ない65歳未満の高血圧患者で2010年1月から2015年3月までの5年2ヶ月の間に高血圧治療薬(アムロジピン(AM)、ニフェジピン(NF)、ベニジピン(BN)、アゼルニジピン(AZ)、オルメサルタン、テルミサルタン)の処方を受け、かつ高血圧治療薬の処方が1年以上続いている患者1810人(男性:853人、女性:957人、平均年齢:50歳)を対象とした。そして、各種Ca拮抗薬群とcontrol群(ARB服用群)に分け、上記の項目を比較した。尚、逆流性食道炎の発症の確認は、内視鏡検査を実施し、逆流性食道炎と診断された患者とした。
【結果】control群(ARB)の逆流性食道炎の発症率が、7.5%(59/781名)であったのに対し、AMは18.8%(111/595名)、NFは21.5%(67/316名)、AZは11.8%(7/59名)、BNは8.4%(5/59名)と、AMとNF服用群において発症率が有意に高かった。また用量別の発症率はAM、NFは各用量において発症率が有意に高かった。一方、AZ、NFは用量依存的に発症率が上昇した。服用期間別の発症率はcontrolの1.2%/年に対し、AZとNFはそれぞれ、3.6%/年、4.6%/年の上昇を示し、2年目以降有意に上昇した。
【考察】用量別発症率の結果からL型Ca2⁺チャネルのみを抑制するAMとNFは、L型以外も抑制するBN、AZと比較して発症率の特徴に違いがみられたことから、L型単独を抑制する薬物では発症のリスクを増大させる可能性が高いと考えられる。服用期間別の発症率の結果から、力価の高いAMとNFにおいて2年目以降から有意に発祥率が上昇したことから、Ca拮抗薬による逆流性食道炎の発症リスクには力価が関与していると考えられえる。以上のことから、先行研究で可能性が示唆されたCa拮抗薬服用により逆流性食道炎のリスクが増大することが明らかとなった。 -
薬局におけるメトトレキサートを例にした重篤な副作用の情報提供に対する患者の意識に関する調査研究
遠藤 栞、茂木 肇、木村 光利、田中 真奈美、小松 由美子、大山 邦之、荻原 政彦
第59回薬学会関東支部大会 日本薬学会関東支部
Event date: 2015.09
Language:Japanese Presentation type:Poster presentation
Venue:日本大学薬学部
【目的】薬剤師は、薬剤司法第25条の2で定められているように患者に対し、薬に関する情報の提供および指導を行わなければならない。これは、患者がためらう重篤な副作用でも例外ではない。しかし、重篤な副作用の提供により、患者の服薬コンプライアンスが低下することも懸念される。本研究では、メトトレキサートによる間質性肺炎を例に取り、重篤な副作用の情報提供に対する患者の意識調査を行った。
【方法】2015年1月26日から4月27日の30日間、(株)ヘルスアップしもふり薬局に来局した患者150名を対象にメトトレキサートによる間質性肺炎について情報提供(発症頻度、後発時期、初期症状)後の意識に関してアンケート調査を行った。なお、実際にリウマチ疾患患者の影響を避けるため、整形外科領域受診の患者は対象外とした。
【結果・考察】対象者に「重篤な副作用を聞き、この薬に対してどう感じたか」と質問したところ「少しためらうが治療のために服用する」、「心配なのでできれば服用したくない」と回答した方が最も多かった。その理由として、副作用情報の中の発症頻度に関する情報が不安に感じたという意見が最も多かった。これにより、薬剤師は発症頻度に対する不安を解消する補足説明を行う必要があると考えられる。 -
業務形態別かかりつけ薬局の利用推進に関する調査研究
山本 夕貴、深澤 貴弥、臼井 滋、小松 由美子、茂木 肇、木村 光利、荻原 政彦
埼玉医療懇話会第35回学術研究講演会 埼玉医療懇話会
Event date: 2015.07
Language:Japanese Presentation type:Oral presentation (general)
Venue:さいたま市文化センター
【背景・目的】薬局では患者毎に薬歴を作成し、薬剤師が薬歴を管理している。これにより、薬剤師は患者の薬剤間相互作用による副作用を防ぎ、重複投与や過量投与のリスクを回避できる。そのため、現在では「かかりつけ薬局」を持つことが推奨されている。しかし、既存の調査によるとかかりつけ薬局を「持っていない」と答えた人は74.8%を占め、その理由として「医療機関の近くを利用しているから」と回答した患者が63.5%を占めていた。したがって、かかりつけ薬局は社会に十分に浸透しているとは言い難い。そこで、本研究では、かかりつけ薬局に関して、業務形態の異なる門前薬局でかつ調剤薬局、面薬局でかつ調剤併設型ドラッグストア(以下、DSと略す)と門前薬局でかつDSに来局した患者を対象に、かかりつけ薬局を持つことに関するアンケートを取り、意識調査を実施し、かかりつけ薬局を持ってもらうためにどのような取り組みが必要であるかを考察した。
【方法】ウエルシア薬局越谷大袋店(面薬局・DS)、ウエルシア薬局野田七光台店(門前薬局・DS)、(株)ヘルスアップさくら薬局(門前薬局・調剤薬局)において、平成26年7月1日から9月6日までに各々に来局した患者のうち、アンケートの同意が得られた患者477名(ウエルシア薬局越谷大袋店158名、ウエルシア薬局野田七光台店158名、(株)ヘルスアップさくら薬局161名)を対象に、かかりつけ薬局を持ったきっかけ、選んだ理由、持つ利点の認知度などについて、アンケート調査を実施した。
【結果】かかりつけ薬局を持っている患者304名を対象に、持ったきっかけについて門前薬局と面薬局で比較すると、面薬局では「薬剤師からの薦め」が42名(34%)と、門前薬局に対し有意に多かった。一方、調剤薬局とDSでは、両者とも「なんとなく選んだ」が最も多く、33名(35%)と36名(42%)で有意な差が認められなかった。次に選んだ理由について、門前薬局では「病院に近いから」が最も多く28名(33%)であったが、面薬局は「相談しやすい」が最も多く24名(19%)であり、門前薬局に対し有意に多かった。一方、DSと調剤薬局では同様な傾向が見受けられたが、両者には有意な差が認められなかった。次に、かかりつけ薬局を持っていない患者173名を対象に、かかりつけ薬局を持つことへの3つの利点の認知度を調査したところ、全て知っていた患者が12名(6%)、いずれかを知っていた患者が73名(42%)、全く知らない患者が88名(52%)であった。そして、いずれかを知っていた患者の内訳は、「薬の管理ができる」が55名(75%)、「副作用を未然に防げる」が51名(70%)、「健康食品や薬の飲み合わせなどの相談ができる」が9名(12%)であった。
【考察】以上の事から、かかりつけ薬局を持つ患者数増加を推進するための取り組みとして、門前薬局では薬剤師による利点の呼びかけを積極的に行い、患者との信頼関係を築くために患者が相談しやすい環境を作るべきである。さらに、薬剤師は処方薬のみではなく、健康食品や市販薬などの幅広い知識を得て、患者に説明していく必要があると考えられた。 -
高血圧患者に対する薬剤師の家庭血圧測定指導効果に関する調査研究
加藤 美穂、茂木 肇、木村 光利、前田 勝代、荻原 政彦
埼玉医療懇話会第35回学術研究講演会 埼玉医療懇話会
Event date: 2015.07
Language:Japanese Presentation type:Oral presentation (general)
Venue:さいたま市文化センター
【背景・目的】高血圧は、最新の高血圧治療ガイドライン2014(JSH2014)によると、現在の患者数が約4,300万人と本邦において最も多い生活習慣病である。高血圧疾患において、適切な治療や血圧管理を行うことは、脳卒中などの病気を予防し、進行を抑制する上で重要である。そのため、家庭血圧を測定することによる自己管理が推奨されている。一方で、家庭血圧測定の意義を正しく理解していない患者が多く見られる。
本研究では、薬剤師が高血圧患者に家庭血圧測定方法の情報提供を行うことが、患者の家庭血圧の管理状況を改善するのか否かや、服薬アドヒアランス向上に効果的であるのかを明らかにし、薬剤師が家庭血圧測定方法指導を行った際の影響について検討した。
【方法】2014年9月~12月までの4か月間に株式会社前田薬局(埼玉)に来局し、降圧薬を服用して高血圧治療を行っている患者101人を対象に、家庭血圧測定の実態を対面式のアンケート調査を行い、その内追跡可能な49名に対して、正しい血圧測定方法指導前後の血圧変化を求め、薬局での指導による家庭血圧の信頼性の向上や指導前後の定期来局からみた服薬アドヒアランスの変化について検討した。
【結果】対象患者101名の内、追跡調査が可能だった49名に、指導前後の家庭血圧値の変動を比較した。その結果、血圧変動について、5mmHg未満であった患者が23名(47%)、5~10 mmHg未満であった患者が19名(39%)、10 mmHg以上であった患者は7名(14%)であった。さらに、対象患者49名に、正しい血圧測定方法を指導することによりアドヒアランスの割合を定期来局率から解析した。アドヒアランス不良患者は、指導前が49名中38名(78%)であったのに対し、指導後は49人中14人(29%)と有意に減少した。
【考察】指導前後の家庭血圧値の変動を比較すると、血圧変化が5mmHg未満と5~10 mmHg未満のある程度指導前から適切な血圧管理が行えていた患者には、薬剤師のリーフレットなどを用いた血圧管理指導が有効であることが示された。一方、10mmHg以上の血圧変化があった患者に対しては、薬剤師が血圧の指導をしただけでは、家庭血圧の管理状況が改善できるとは限らず、薬物治療に関する指導も併せて行うことが必要と思われる。また、薬剤師による血圧管理指導でアドヒアランス不良患者が有意に減少したことは、薬剤師が高血圧患者に対し、家庭血圧測定の意義を説明することで、患者の服薬忘れの減少に寄与したと考えられる。
以上のことから、高血圧患者の服薬アドヒアランスを向上させるためには、薬剤師が薬局の窓口で、リーフレットや口頭だけの血圧管理指導は一部の患者には有効であった -
地域薬局におけるセルフメディケーションに対する患者の意識に関する調査研究
小島 望、茂木 肇、木村 光利、荻原 政彦
埼玉医療懇話会第35回学術研究講演会 埼玉医療懇話会
Event date: 2015.07
Language:Japanese Presentation type:Oral presentation (general)
Venue:さいたま市文化センター
【背景・目的】セルフメディケーションとは、世界保健機構(WHO)の定義によると「自分自身の健康に責任を持ち、軽度な身体の不調は自分で手当てすること」とされ、患者自身が一般用医薬品を使用することによって、自らの健康を守ることである。そして、患者がセルフメディケーションを行うことにより、医療費や介護費の高騰を抑制し、現在の医療制度を維持することが可能になると考えられる。しかし、現在の日本では、急速な高齢化と地方の過疎化に伴う骨粗鬆症などの慢性疾病患者数が増加し、セルフメディケーションの推進が十分に図られていない。
そこで、本研究では、地域薬局におけるセルフメディケーションの患者の意識に関して調査し、これらの結果を元に、セルフメディケーションの推進を向上させるために地域薬局の薬剤師が行うべき対策を考察した。
【方法】2014年12月~2015年2月の3ヶ月間に、長野県伊那市の門前薬局に来局した患者130名(平均年齢69歳)に、①年齢、性別②セルフメディケーションの認知度③軽微な不調がある場合の対処方法④処方薬と健康食品等との飲み合わせの有無及び理由⑤薬局薬剤師への相談の有無及び理由の5項目について口頭で聴き取り調査を実施した。
【結果】セルフメディケーションという言葉を知っているかという質問に対し、「知っている」と回答した患者は130人中4人(3%)であり、「知らない」と回答した患者は126人(97%)と有意に多かった。また、軽微な不調がある際はどのような対処方法をとるかという質問に対して「自分で薬をドラッグストアなどで買い使用する」と回答した患者が55人(42%)と最も多かった。次いで、「処方薬の他に健康食品やサプリメントなどを使用するか」という質問に対して、「飲んでいる」と回答した患者は77人(59%)であった。そこで、その患者77人に対して、処方薬と一般医薬品等との併用に関し、「薬剤師に相談する」と回答した患者は2人(3%)であり、一方、「薬剤師に相談しない」という患者が75人(97%)と大部分であった。
【考察】セルフメディケーションという名称の認知度は130人中4人と全体の3%と低く、一方、それらの患者の多くのは、セルフメディケーションの定義に相当する行為を行っていることが判明した。これらのことは、本調査薬局が高齢者の割合が多い地域薬局であることが主な要因であると考えられた。更に、それらのほとんどは薬剤師に相談をしていない事も判明した。そのため、今後、地域薬局の薬剤師は処方薬だけではなく一般用医薬品等に対しても正しい知識を習得することと共に、患者の一般用医薬品等の使用動向を把握することがセルフメディケーションの推進に繋がるものと考えられる。 -
PTP包装による誤飲対策に関する薬学的調査
遠藤 沙紀、茂木 肇、木村 光利、荻原 政彦
埼玉医療薬学懇話会 第34回学術研究講演会 埼玉医療薬学懇話会
Event date: 2014.07
Language:Japanese Presentation type:Poster presentation
Venue:城西大学薬学部
【背景・目的】Press through package(以下、PTP)とは押し出し式の薬剤包装であり、衛生的で利便性があるため、現在最も普及している。その一方で、薬をシートごと服用するなどの誤飲事故が続き、問題となっている。そこで本研究では、PTP誤飲に関する論文から対策案を調査し、薬剤師の視点からどのように予防に努められるかを考察した。
【方法】医学中央雑誌、国立国会図書館等から『PTP誤飲とその対策』に関する論文(1972年1月~2013年11月)を調査対象とした。その予防案を、①薬剤師が出来ること、②企業側の改善によるもの、③その他に分類した。
【結果】調査の結果、対策記載論文数は67件(延べ201件)得られた。その内、①薬剤師が出来ることは延べ90件(45%)あり、主な項目として、患者への指導(37件)、一包化(31件)などが挙がった。②企業側によるものは87件(43%)で、X線非透過性にする(24件)、辺縁を鈍角にする(23件)などが挙がった。③その他は24件(12%)で、PTPを処方しない(9件)、服薬時に周りの者が包装から出して渡す(9件)などが重要とされた。
【考察】以上の結果から、薬剤師が出来ることの方が、企業側の改善によるものを、件数的には同等であったが、個々の詳細な意見や考察から重要視されていることがわかった。企業側への要望は実現まで時間を要するため、薬剤師がPTP誤飲に関する啓発活動をし、薬だけでなくその包装容器の事故に関して指導を丁寧にすることが重要と考えられた。 -
山梨大学医学部附属病院の薬務室における安全・安心な医療の提供に関する薬剤師の役割と連携について
二階堂 綾美、茂木 肇、木村 光利、長澤 みわ子、寺島 朝子、荻原 政彦
埼玉医療懇話会第34回学術研究講習会 埼玉医療懇話会
Event date: 2014.07
Language:Japanese Presentation type:Poster presentation
Venue:城西大学薬学部
【背景・目的】平成18年版厚生労働白書より、我が国の医療提供体制は、国民皆保険制度とフリーアクセスの下で、国民の健康を確保する整備が進められる中、医療を取り巻く環境の変化への対応として、より質の高い効率的な医療サービスを提供することが課題となっている。そこで、臨床現場では、どのような対応が行われているか、実習先の一つである山梨大学医学部附属病院(以下、当院)を例に、現状の把握を目的とした。
【方法】平成25年6月3日~7月26日に、当院薬務室において、薬剤師が院内各部署や他職種とどのような連携を図っているか、現状を把握し取りまとめた。
【結果・考察】当院薬務室では、薬剤部門システムによるデータ管理及び担当薬剤師による目視での発注管理を合わせて行うことにより、適正在庫を維持していた。この定期発注にさらに臨時発注を組合わせることにより、消費予測が困難な医薬品について、欠品を起こさず臨床現場の要求に速やかに応じることを可能にしている。また不良在庫を発生させず、卸業者に対して緊急配達などの負担を軽減できると考えられる。
即ち、薬剤部門システムのデータ管理と担当薬剤師の目視での定期及び臨時発注を組合わせることは、不良在庫の発生を抑え、病院の健全な経営に貢献し、患者に安心かつ安全で継続的な医療体制の提供を維持できるものと考えられる。 -
日本の精神疾患患者における禁煙治療の現状と諸外国の場合との比較について
関口 菜都子、茂木 肇、木村 光利、荻原 政彦
埼玉医療懇話会 第34回学術研究講演会 埼玉医療懇話会
Event date: 2014.07
Language:Japanese Presentation type:Poster presentation
Venue:城西大学薬学部
【背景・目的】精神疾患患者の喫煙率は、一般成人と比較すると高値である。その要因として、精神疾患患者は禁煙に対する動機が明確でないことや、動機を治療終了時まで保つことが出来ないケースが多く治療を中断してしまうため、再喫煙率が高いことなどが挙げられる。そこで、日本と諸外国の精神疾患患者の禁煙成功率や治療方法を文献的に調査し、これからの日本の禁煙指導に薬学的に必要なものは何かについて考察した。
【方法】日本と諸外国の精神疾患患者における禁煙成功率および治療方法について比較するため、医学中央雑誌やThe Journal of the American Medical Associationなどから文献検索を行い、詳細を解析した。
【結果】日本における精神疾患患者の禁煙成功率は23.9±6.8%であったのに対し、諸外国は44.8±3.4%と、諸外国の方が禁煙成功率が高かった。次に、それらの治療方法を分類したところ、日本は薬物治療のみだったのに対し、諸外国は薬物治療の他にグループ認知行動療法(CBT)、動機づけ強化療法(MET)などのカウンセリングを組み合わせた治療を行っていた。
【考察】諸外国の禁煙成功率が日本よりも高い理由として、CBTやMETなどのカウンセリングを併用している為と考えられる。CBTやMETなどのカウンセリングは薬剤師も服薬指導時などに実践することが可能であるため、薬剤師という立場からも、悩んでいる人に気付き、話を聞いて必要な支援につなげ、ゲートキーパーとして積極的に禁煙治療に関与していくことが望まれる。 -
かかりつけ薬局と服薬アドヒアランスの関係性について
岩野 貢典、石渡 知子、茂木 肇、木村 光利1、荻原 政彦
埼玉医療懇話会第34学術研究講演会 埼玉医療懇話会
Event date: 2014.07
Language:Japanese Presentation type:Poster presentation
Venue:城西大学薬学部
【背景・目的】かかりつけ薬局を持つ患者は、自身の治療に対して積極的であり、薬の専門用語に関する知識を持つことで、高い服薬アドヒアランスがあると言われている。しかし、この詳細な調査は行われていない。そこで、かかりつけ薬局を持つ患者が、専門用語としての日本薬剤師会が伝わりにくいとされている「後発品」に関する知識を持ち、高い服薬アドヒアランスがあるのか否かを、かかりつけ薬局を持たない患者と比較検討し、今後の薬剤師としてどのような取り組みが必要なのかを考察した。
【方法】調査期間は、平成26年2月10日~平成26年3月14日の33日間とし、開成堂石渡薬局の来局者を対象に、かかりつけ薬局の有無を分類し、①後発品に関する理解度②薬剤師の説明を理解しているかに関してアンケートを行った。
【結果および考察】①の項目から、かかりつけ薬局あり群となし群では、後発品についての理解度に違いは認められなかった。その一方、②の項目から、かかりつけ薬局あり群は、「薬剤師の説明を理解している」患者が多かった。これは、薬剤師と患者の関係が良好であり、患者が薬剤師の説明を聞いているためと考えられる。以上のことから、かかりつけ薬局を持っている患者では、薬剤師の説明を理解しており、薬剤師を身近な存在として感じていることが明らかになった。したがって、かかりつけ薬局の利用を啓発することで、アドヒアランスの向上に繋がると考えられる。 -
薬局来局者におけるOTC医薬品ネット販売に関する意識調査
小田 翔平、長島 こぎく、茂木 肇、木村 光利、荻原 政彦
埼玉医療懇話会第34回学術研究講演会 埼玉医療懇話会
Event date: 2014.07
Language:Japanese Presentation type:Poster presentation
【背景・目的】2013年の薬事法の改正により、正式にOTC医薬品がインターネットで販売できるようになったが、患者がOTC医薬品を適切に選択し、それら医薬品を安全に使用できるか否か問題視されている。そこで今回、OTC医薬品インターネット販売(以下、ネット販売と略す)に関する患者の意識を調査し、今後薬剤師がOTC医薬品ネット販売についてどのように向き合っていくべきか考察した。
【方法】2014年1月7日~2014年6月2日に勝瀬薬局に来局した患者71名を対象にOTC医薬品ネット販売について、アンケート形式で調査を行った。
【結果・考察】当局に来局した大多数の患者において、OTC医薬品のインターネット販売に対する認知度は高かったが、その患者のほとんどは、「自分で正しい薬を選択できない」、「副作用が起こるか心配」という理由から、OTC医薬品ネット販売を利用したくないと考えていることが明らかとなった。これは、患者がOTC医薬品ネット販売に関して、メディアなどを通じて認知しているが、患者は薬剤師を介さずに薬を購入することについて不安に感じていることが示された。また、OTC医薬品ネット販売に求める事として、販売薬に対する「信頼性」や「アフターフォロー」、「薬の情報提供」などの今まで薬剤師が対面で実践していた内容であった。これらの結果から、薬剤師はOTC医薬品ネット販売に関して、薬剤師が従来行っていたように積極的に介入することが求められていると考えられる。 -
Ca拮抗薬とグレープフルーツジュースの飲み合わせを例にした患者の薬に対する知識の定着を目指した取り組みについて
中村 梨絵、茂木 肇、木村 光利、白石 卓也、荻原 政彦
埼玉医療懇話会第34回学術研究講演会 埼玉医療懇話会
Event date: 2014.07
Language:Japanese Presentation type:Poster presentation
Venue:城西大学薬学部
【背景・目的】病院や調剤薬局で勤務する医療従事者が、患者へ薬や薬物治療、病気等の情報提供を行う際、その内容に関して人為差を解消すべく、紙媒体が多く使用されている。一方、日本製薬工業協会の調査によると、患者は「薬の飲み合わせ」に関する服薬情報を多く望んでいたことが分かった。そこで本研究では、Ca拮抗薬とグレープフルーツジュースを例にとり、パンフレットを作成し、配布することにより、患者が薬の飲み合わせに対し、知識が定着するか否かについて検討した。
【方法】平成25年11月18日~12月28日に薬局アポック三芳店で、Ca拮抗薬(アムロジピンとニフェジピン)が処方された患者51名に、パンフレット配布前後で、Ca拮抗薬とグレープフルーツジュースの飲み合わせに関するアンケートを実施し、パンフレット配布による効果を比較した。
【結果】本研究で作成したパンフレット内容に関する全ての設問項目において、パンフレット配布後では、配布前と比較して有意な知識の定着が認められた。しかし、服用間隔において4割近くの患者が未だ「2時間」と誤った回答を行った。
【考察】本研究において、医療用語を使用せず端的に作成したパンフレットを用いて情報提供をすることが有効的であった。しかし、服用間隔においては誤った回答の是正が少なかったことから、パンフレット内容の改良や何度も服薬指導時に情報提供していく必要があると考えられた。 -
後発医薬品に対する医師・薬剤師の意識について
渡部 秀樹、渡部 秀人、太田 昌一郎、斎藤 耕一、時任 敏基、杉本 あけみ、茂木 肇、木村 光利、荻原 政彦
埼玉医療懇話会第34回学術研究講演会 埼玉医療懇話会
Event date: 2014.07
Language:Japanese Presentation type:Poster presentation
Venue:城西大学薬学部
【背景・目的】政府は薬剤費の抑制を目的に、後発医薬品(以下、後発品と略す)の使用を推奨している。しかし、我が国の後発品のシェア率は欧米諸国と比較すると低水準である。そこで、医師及び薬剤師を対象に後発品に関する意識調査を行い、その結果から薬剤師として後発品普及に必要な対策について考察した。
【方法】調査期間は、平成25年7月~平成25年11月とし、所沢メディカルクリニック、ときとうクリニック、薬樹グループ薬局、坂戸中央病院に勤務する医師21名、薬剤師52名にアンケートを行った。主な項目は①後発品の普及を支持しているのか、②医師と薬剤師は後発品の普及に対してどのような連携をとっているのかとした。
【結果および考察】①の項目から、後発品の普及に対し、医師は消極的で、薬剤師は積極的な方が多く、その理由とし、医師は薬局でどの後発品が使用されるかわからないというデメリットが大きく、薬剤師は後発医薬品調剤体制加算が得られるというメリットが大きいためと考えられる。②の項目では、医師は薬剤師から後発品に関する情報提供を期待しているが、薬剤師はその情報提供を重要だと考えていないという傾向が見受けられた。以上のことから、今後は薬剤師が率先して後発品の情報を医師に提供する場としての報告会を開催し、医師の不安を軽減すことが大切だと考えられる。これにより、後発品のシェア率を上げ、薬剤費の縮減に繋がることを期待したい。 -
患者の内服薬の飲み忘れにおける残薬の管理と服薬に関する調査研究
鈴木 舞、茂木 肇、木村 光利、飯島 朋子、荻原 政彦
埼玉医療懇話会第34回学術研究講演会 埼玉医療懇話会
Event date: 2014.07
Language:Japanese Presentation type:Poster presentation
Venue:城西大学薬学部
【背景・目的】現在、厚生労働省の調査によると、薬の飲み忘れ等で発生している残薬は、年間約500億円にも及ぶといわれており、その対策が求められている。しかし、実際、患者やその介護者がどのような残薬管理をしているのかは明確になっていない。そこで、残薬管理に関するアンケートを行い、その結果から残薬発生防止の取り組みについて考察した。
【方法】本研究は、2013年7月~9月の2か月間に、しんわ薬局狛江通り店に来局した患者を対象に残薬管理に関するアンケート調査を行った。調査結果の解析では、対象者を薬を自身で管理している自己管理者と他者が管理する他者管理者の2群に分類し、それぞれ比較した。
【結果・考察】自己管理および他者管理の両群とも、薬を「薬袋」で管理している患者が多く、ピルケースやお薬カレンダーを使用している患者は少ない傾向であった。更に、「薬袋」で薬を管理している患者は、残薬をそのまま保管もしくは廃棄している割合が多く、残薬を薬局で調整している患者は少なかった。このような結果から、残薬発生を抑制するためには、残薬を保管、廃棄している患者層が、意識的に薬局で残薬を管理・調節してもらうことが重要であり、その対策として、飲み忘れた薬をバックなどに入れ、それを薬局へ持参し、薬を処方調節する「節薬」バック運動の導入が推奨できると考えられる。 -
調剤薬局における電話問い合わせの減少を目指した取り組みについて
佐藤 紘大、石山 光、原 邦之、茂木 肇、木村 光利、荻原 政彦
第57回日本薬学会関東支部大会 日本薬学会関東支部
Event date: 2013.10
Language:Japanese Presentation type:Poster presentation
Venue:帝京大学板橋キャンパス
【目的】調剤薬局における電話問い合わせへの対応は、薬剤師の重要な業務の一つである。しかし、電話による回答には、時折、予期せぬ時間を費やすことがあり、調剤業務が遅れ、患者の待ち時間の増加にも繋がる。そこで、本研究では、ポスターによる注意喚起の前に電話問い合わせの多かった「飲み合わせ」に関するポスターを掲示し、注意喚起を促すことで、電話問い合わせの件数と内容がどのような変化をするのか調査した。
【方法】調査期間は、ユニコ調剤薬局本店(埼玉県坂戸市)の来局者を対象に、平成25年5月7日~平成25年7月14日までの10週間で、「薬の飲み合わせ」に関するポスターを作成し、投薬窓口に掲示し、電話問い合わせ件数およびその内容を調査した。
【結果】ポスターの掲示前後では、電話問い合わせの内訳において、「飲み合わせ」の項目の割合が33.3%から20.9%と有意な減少が認められた(P<0.05)。これに対して、「用法・用量」の割合は、20%から25.6%へと増加傾向が見受けられた。
【考察】「飲み合わせ」に関するポスターの掲示により、患者の「飲み合わせ」に対する疑問点を、投薬時に解消することができ、その結果、総電話問い合わせ件数の減少に繋がったものと考えられた。しかし、この疑問点の解消により、「用法・用量」など新たな疑問点が患者に生じ、他の項目の割合が若干増加した。今後は、今回調査した電話問い合わせ内容を基に、患者に必要な情報を提供し、ポスターなどを用いて注意喚起していくことが、全体的な電話問い合わせ件数を削減させるのに有用だと考えられた。 -
高血圧治療薬における後発医薬品の経済評価について
中村 仁、添田 修司、金井 理、茂木 肇、木村 光利、荻原 政彦
第57回日本薬学会関東支部大会 日本薬学会関東支部
Event date: 2013.10
Language:Japanese Presentation type:Poster presentation
Venue:帝京大学板橋キャンパス
【目的】現在、日本における傷病別一般診療費構成割合の中で、循環器系疾患は、21.2 %と1位であり、65歳以上に至っては約28.7 %を占めている。循環器系疾患は、院外処方せんの発行率が高く、様々な後発品が普及しているため、この薬剤料の抑制が国民医療費適正化の観点から重要になる。蕨中央薬局(以下、当局)においても、循環器系疾患の患者が後発品に変更する傾向が、今後高くなると予想される。後発医薬品の普及が進めば、医療費の削減につなげることが可能となるが、現在、その普及率は、数量シェアで22.8%と停滞している。そこで、本研究では、循環器系疾患のうち、高血圧治療薬の先発品と後発品の使用状況調査を行い、患者の負担額を検証すると共に、患者が後発品を使用してもらうためには、薬局としてどのような取り組みが必要か考察した。
【方法】平成24年4月1日~平成24年9月30日までの期間、蕨中央薬局においてアムロジピンが処方された患者(総数:425名)を対象に薬歴から、患者負担額を調査し、その差を比較検証した。
【結果および考察】1ヶ月を28日とし1ヶ月毎に処方せんを当局に持参したと仮定して12ヶ月間服用を続けた際の費用を検証した結果、先発品から後発品に切り替えた場合の患者負担額は、1ヶ月あたり1割で70円、3割で210円軽減した。12ヶ月では1割で840円、3割で2,520円軽減した。1回の処方せん受付の軽減額が少ないため、後発品に変更しても患者自身が経済的に得を感じないことが普及遅れの原因であると考えられる。従って、保険診療の仕組みと長期的な負担軽減額を視覚的に患者へ説明し、後発品への変更を働きかけていくことが求められる。 -
残薬発生の原因調査
秦 智子、北畑 智英、曽我部 直美、茂木 肇、木村 光利、荻原 政彦
埼玉医療薬学懇話会 第33回学術研究講演会 埼玉県医療薬学懇話会
Event date: 2013.06
Language:Japanese Presentation type:Oral presentation (general)
Venue:大宮法科大学院大学
【背景・目的】残薬とは、病院などの医療施設から処方された薬の飲み残しのことである。平成24年度、診療報酬改定において、「残薬確認」が、薬剤服用歴管理指導料の項目に追加された。この「残薬の確認」制度は、年間約500億円といわれる飲み忘れ等による薬剤の無駄をなくし、医療費削減に繋げることを目的に導入された。それに伴い、患者の服薬アドヒアランスを高めてQOLの向上に繋がるものとして、導入前から注目を集めていた。そこで、本研究では、残薬の状況や残薬を無くすための工夫ならびに、残薬発生の原因といった項目に関するアンケートを患者に実施し、その結果から残薬を減らすための対策を考察した。
【方法】埼玉県済生会栗橋病院(以下、当院)における平成24年12月と平成25年4月に服用中薬剤を持参して、循環器科に入院してきた患者19名を対象に、入院の際に持参した薬の入院前の服用状況についてアンケートを実施した。
【結果】対象患者19名中、残薬があったのは7名であった。その7名の内、飲み忘れが5名、服用方法の理解不足が2名であった。更に残薬がないと答えた12名を対象に、飲み忘れ防止のために工夫している点の調査を行ったところ、次回飲む分の薬を用意しておくと答えた患者が4名、一包化と答えた患者が2名、服用する時間を1回にまとめてもらったと答えた患者が1名、特になしと答えた患者が5名であった。患者の持参薬の平均数は、残薬のあった患者(7名)では約8.3種類、残薬のなかった患者(12名)では約6.2種類であった。残薬発生の頻度は、7名中1週間に1回未満の患者が4名、ほぼ毎日が1名、不明が2名であった。残薬があった患者の年代別では、70代が6名と一番多く、次いで60代が1名であった。薬の知識について、『薬の服用を自己判断で中止したり、用法・用量を変更して薬を服用すると薬の効果が減弱したり、副作用が起こる可能性が高くなることを知っていますか』という質問に対して19名中3名が知らないと答えた。しかし、この3名とも残薬はなかった。【考察】上記の聞き取り調査の結果から、自宅における残薬発生の原因として最も多いものは、飲み忘れであると考えられる。また、今回は、アンケートに受け答えのできる患者のみを対象にアンケートを実施したため、薬の飲み方について理解が不足している患者はもっと多い可能性が考えられる。一方、薬を飲んだ時に次回飲む分の薬を用意しておくといった工夫により、残薬を減らすことが出来ると考えられる。更に、80代(2名)で残薬があった患者が0名であった理由として、家族による薬の管理があったためと考えられる。薬の飲み方について理解が不足している患者には、家族による薬の管理が大切と考えられる。また、ほぼ毎日忘れる患者では、薬識が薄く、薬剤師の指導によるアドヒアランスの向上が大切と考えられた。更に、最も残薬の多い用法は、毎食後であったため、出来るだけ作用時間の長い薬に切り替えて、服用回数を少なくするなどで、残薬を減らすことが出来ると考えられた。 -
前立腺がん患者におけるタキソテール療法について
浅田 憲宏、茂木 肇、木村 光利、斎藤 恭正、齊藤 昌久、荻原 政彦
埼玉医療薬学懇話会 第33回学術研究講演会 埼玉医療薬学懇話会
Event date: 2013.06
Language:Japanese Presentation type:Oral presentation (general)
Venue:大宮法科大学院大学
【背景・目的】
前立腺癌は、天寿癌とも言われ、発見されずに一生を終える場合もあるが、近年、Prostate Specific Antigen(PSA)検査の普及により、罹患率は増加傾向にある。日本では、2006年の罹患率が、胃癌、大腸癌、肺癌に次いで第4位であるが、2020年の罹患数は肺癌に次いで2番目になることが予想されている。そのため、今後、前立腺癌に対する標準的治療やドセタキセル投与による副作用等の予防が重要と考えられる。そこで、今回、ドセタキセル療法患者の治療経過を追跡するとともに、前立腺癌の治療について検討した。
【症例】
80代、男性、前立腺癌、組織分類 Gleasonスコア(5+5=10)、StageⅣ、ホルモン療法を3年半行っていたが、PSA値の上昇と骨転移の悪化により、ドセタキセル(95mg)による治療を開始することとなった。ドセタキセル初回治療において、投与開始から退院までの治療経過を追跡するとともに、経過中に生じた好中球減少、その際に投与した顆粒球コロニー刺激因子(G-CSF)に焦点を当て、症例・治療効果について検討を行った。
【結果】
該当患者に対して、発熱性好中球減少症の予防の視点から、白血球数(WBC)、好中球数と体温をモニタリングしたところ、入院前血液検査結果では、特に目立った数値の異常はなかった。しかし、ドセタキセル(95mg)の初回投与にともない、day4の血液検査では、WBCが減少傾向にあり、day7には、WBC、好中球数ともにgrade2まで低下した。day11にWBCはGrade2の減少であったが、好中球数はGrade4まで減少が認められ、2日間グランシリンジ®(G-CSF製剤)75 μg1日1筒投与した。その後、day13にWBC 104.5×100/mm3、好中球数3866/mm3まで回復した。入院中の目立った発熱はなく経過し、発熱性好中球減少症の発症を回避することができ、退院となった。
【考察】
本症例では、ドセタキセル投与による発熱は生じなかった。好中球数500/mm3未満になった際に、顆粒球コロニー刺激因子(G-CSF)を、ドセタキセルの副作用回避の目的で併用したため、適正使用であったと考えられた。一方、発熱はなかったものの、好中球数500/mm3未満、Grade4の好中球減少が観察されたので、次回、ドセタキセル療法を行う際には、ドセタキセルの投与量の減量や好中球数の変動に十分注意し、1000/mm3未満になった時点で、G-CSFの投与を検討する必要があると考えられた。しかし、ドセタキセルの投与量を減量することで、治療効果が認められず、副作用のみが生じてしまう可能性も考えられるので、その際には、他の抗癌剤への変更も検討する必要があると考えられた。今回の症例のように、患者のWBC、好中球、及び体温を連日モニタリングすることで、発熱性好中球減少症を回避することができ有益であった。 -
糖尿病患者に対するDPP-4阻害薬の併用療法の有効性に関する調査
奥隅 舞、茂木 肇、木村 光利、宮川 高一、森 貴幸、荻原 政彦
埼玉医療薬学懇話会 第33回学術研究講演会 埼玉医療薬学懇話会
Event date: 2013.06
Language:Japanese Presentation type:Oral presentation (general)
Venue:大宮法科大学院大学
【背景・目的】わが国における糖尿病患者数は、平成19年度では約890万人(15.3%)、平成23年度でも約9103万人(15.7%)であり、国民の約1/7が罹患している国民病の一つである。糖尿病治療の目標は、症状の改善とともに、合併症や増悪を防ぎ、健常人と変わらない日常生活の質(QOL)を保ち、寿命を確保することである。しかし、近年、偏った血糖コントロールに伴い、低血糖や体重増加、さらには死亡率を増加させる可能性が指摘されている。DPP-4阻害薬は、上記の問題点を解消することができると期待されている薬剤であり、現在臨床で広く使用されている。そこで今回、糖尿病患者の検査値を基に、処方されたDPP-4阻害薬や他の糖尿病用薬との併用効果について調査した。さらに、その結果を生かしたより最適な薬物治療について考察した。
【方法】調査対象期間は、クリニックみらい国立、くにたちウラン薬局における平成23年8月~平成24年11月の16ヶ月間で、調査項目は、電子カルテ、紙カルテ、電子薬歴から年齢、BMI、検査値および処方薬であった。対象患者は、クリニックみらい国立、くにたちウラン薬局共に利用されている1型糖尿病患者28名、2型糖尿病患者119名、合わせて147名を対象とした。
【結果】HbA1cとBMIの関係は、1型糖尿病患者は変化が見られなかったが、2型糖尿病患者ではHbA1cが高くなるにつれてBMIも高くなった。各薬剤による治療開始時から治療時のHbA1cは低下傾向がみられ、その低下率は、シタグリプチン単独群0.5%、アログリプチン単独群0.1%であった。また、2剤併用群ではシタグリプチン・グリメピリド併用群0.8%、シタグリプチン・インスリン併用群0.2%、アログリプチン・グリメピリド併用群0.2%であった。一方、3剤併用群では、シタグリプチン・グリメピリド・ピオグリタゾン併用群1%、アログリプチン・グリメピリド・ピオグリタゾン併用群0.2%、シタグリプチン・グリメピリド・α-GI併用群2%であった。しかし、アログリプチン・グリメピリド・α-GI併用群に至っては0.1%上昇した。
【考察】2型糖尿病患者ではHbA1cとBMIに正の相関が認められ、また1型、2型糖尿病患者ともにコレステロールとBMIにも正の相関が認められた。これらのことから2型糖尿病ではHbA1cとコレステロールの値も密接に関わっていることが考えられた。また、2型糖尿病患者に対して、特にシタグリプチン・グリメピリドの併用で、HbA1cの平均を0.8%低下させ、HbA1cの数値が高い患者に変化が大きかったことから、特にHbA1c値が高い患者にシタグリプチンの併用が有効と考えられた。 -
退院処方の変更から見えてくるリスクについて
武笠 裕優、新津 京介、木村 正彦、大塚 潔、堀口 久光、茂木 肇、木村 光利、荻原 政彦
埼玉医療薬学懇話会 第32回学術研究講演会 埼玉医療薬学懇話会
Event date: 2012.07
Language:Japanese Presentation type:Oral presentation (general)
【背景・目的】薬剤によるヒヤリハット事例が昨今問題となる中、自治医科大学附属さいたま医療センター(以下、当院)においても、調剤過誤(インシデントレポート)が数多く挙げられいる。中でも昨年度1年間の薬剤師による調剤過誤のうち、処方変更に係るものが総数244件中77件あり、全体の1/3と多くを占めている。処方変更に伴う再調剤は変更点の見落とし等が起こりやすいため、新規の調剤に比べてミスが起こりやすい。特に退院の前日・当日の処方変更は時間的な余裕が少なく、ミスが増える可能性が高い。従って、リスク管理の観点から処方変更の実態を把握し、上記のような調剤ミスや過誤を減らすための対策を講じる必要がある。
本研究では、今日退院処方の変更率及び処方変更内容・変更時期を調査することにより、再調剤におけるリスクを検証し、その結果を基にリスク回避(あるいは軽減)などの対策(方法)を考察した。
【方法】平成23年4月~7月の4ヶ月間の当院15病棟における退院薬を処方された患者(総数:2648名)を対象に退院処方の変更率・変更時期及び変更内容の詳細(ハイリスク薬などの薬の種類とその件数・内訳)についてカルテ調査を行った。
【結果】調査を行った4ヶ月間の間に退院処方が変更された患者は、2648名中1482名であった。病棟別変更率の多くは30-50%前後であったが、中でも、心臓外科、循環器内科、内分泌・呼吸器内科の3病棟は60%を超える変更率だった。この3病棟のうち、循環器内科について詳しく調査したところ、処方変更が生じた241件のうち、薬剤の追加が171件(55.7%)と最も多く、次いで薬剤日数変更48件(15.5%)、薬剤削除27件(8.7%)、用量変更26件(8.4%)、薬剤変更が13件(3.9%)、1包化12件(3.9%)、用法変更7件(2.3 %)という結果だった。また、この追加薬剤の中、ハイリスク薬が21.5%と追加の全体の約2割を占めており、その内訳は、抗凝固・抗血小板薬23件(9.3%)と最も多く、次いで抗不整脈薬14件(5.7%)、糖尿病治療薬(インスリン製剤7件を含む)13件(5.3%)、その他(ステロイド・ジゴキシン製剤・抗てんかん薬各1件)3件(0.4%)だった。追加された薬剤の残りの約8割が、一般薬で、その内訳は硝酸薬が110件(45%)と最も件数が多く、次いで解熱鎮痛薬16件(6.5%)、下剤9件(3.7%)、ACE阻害・ARB8件(3.3%)、胃酸分泌抑制薬・脂質異常症治療薬各7件(2.8%)という結果であり、一般薬ではニトログリセリン舌下錠の追加が約5割を占めるという特徴的な結果を示した。
【考察】循環器内科では、追加薬剤の内訳の中でニトログリセリン舌下錠が全体の45%を占めていた。これは、主治医が退院薬を処方する際、入院時の定期処方をDo処方(前回と同じ処方)として出してしまうことからニトログリセリン舌下錠のような頓服薬が退院処方から漏れてしまうものと考えらえる。薬剤師が病棟に常駐するようになれば、医師が退院処方を出す前に、必要な患者に対してニトログリセリン舌下錠を処方するように進言できるようになるので、追加の件数が減り、インシデントリスクも軽減することができ、全体の処方変更率も下げられるものと考える。